RQ-PCR技术检测白血病融合基因与其临床应用.pdfVIP

·469· 实 验 与 检 验 医 学 V01．28 第28卷第5期 No．5 EXPERJMENTAL 2010年10月 ANDLABORATORYMEDICINE 0ct．2010 ·综述· RQ—PCR技术检测白血病融合基因及其临床应用 江梅综述，万腊根审校 (南昌大学第一附属医院检验科，江西南昌330006) 文献标识码C 中图分类号R596．1，R733．7，Q754 文章编号1674—1129(20lO)05一0469—04 [蜀堂：3璺鱼蚴!还亟至亟霞贼巫[] 关键词：白血病；融合基因；RQ—PCR；分析性能 q22)染色体易位，使17号染色体上的RARa基因与 time 实时荧光定量PCR技术(realquantjtatjve 位于15号染色体上的PML基因融合后形成的 PCR，RO—PCR)是由美国ABI公司于1995年研发用 于核酸定量检测技术．目前该技术在科研和临床上 号内含子。PML基因有3个断裂点．分别位于6号 已得到了广泛的应用．也为白血病的分子生物学研 外显子、6号内含子和3号内含子，形成Long(55％)、 究提供了新的手段．已有很多临床血液病学家和检 验学家应用该技术在白血病融合基因检测及其临床 基因是APL的特异性分子标志．见于98％的APL 应用进行了大量的研究报道．本文拟就国内外的相 关研究报道对检测白血病融合基因的RQ—PCR技 诊断。 术作一综述。 1．3 l白血病融合基因 使位于22q22的AML1基因在5号内含子处断裂与 多数白血病患者具有特异性染色体异常：如急 位于8q22的ETO基因在2号外显子处断裂后融合 性早幼粒细胞白血病(APL)、慢性粒细胞白血病 (CML)等，由于染色体易位、倒位等变异，使得基凶结要发生于M：的白血病中．文献【3】报道阳性率达 构重排而产生融合基阒．而成为白血病特异性的分 90％，可作为M压诊断的重要分子标志，也可用于其 子标志．因此对融合基因的检测可用于白血病的分 它AML如M，、M。、M，的分子分型诊断，且其阳性时 子生物学分型诊断、预后观察及微残留病灶(MRD)预后良好．完全缓解率高达98％．5年存活率达 的诊断．目前常见于临床的白血病融合基因有以下 L】一ET0融合基因的检测可作为M2b 67％。因此AM 几种【瑚。 和部分其它AML诊断、预后观察及MRD诊断的分 1．1 bc卜abl融合基因：是由t(9；22)(q34；q11)，使子标志。 9q34上的原癌基因abl与22qll上的bcr基因合并1．4 6) 形成bc卜abl融合基因．并转录产生8．5kb的融合 mRNA。染色体易位时abl基因的断裂点位于第二外 显子(a21(实际是从第1内含子到第2内含子问 显子(A)或8号外显子(D)或7号外显子(E)断裂点断 100kb的