有机试剂5,荧光试剂.pptVIP

第五章 荧光试剂 荧光的发现及发展 荧光产生的理论基础 分子荧光光谱 荧光强度、荧光量子产率和荧光寿命 有机试剂结构与荧光的关系 代表性荧光试剂 荧光的发现及发展 十六世纪被发现，但对荧光的产生原理和条件 1852年Stokes考察奎宁和叶绿素荧光 发现荧光波长比照射光波长要长，认定是物质吸收光后重新发射出的光，，提出了“荧光” 1867 Goppetsroder 桑色素荧光检测铝 二十世纪初，已荧光素、稠环芳烃及曙红等600余种化合物有荧光 1924年 Wawwillous测定荧光产率 1926年 Gavila对荧光寿命进行了测定 荧光产生的理论基础 基态和激发态 单重态（S)和三重态 (T) 荧光激发光谱和荧光发射光谱 λemλex 斯托克斯（stokes）位移 荧光强度、荧光量子产率和荧光寿命 荧光强度 F= 2.3ФFIoεbc F—荧光强度；ФF—荧光量子产率，Io—照射到被测物质上的光强度；ε—该物质的摩尔吸光系数；b—检测池厚度；c—物质浓度 荧光量子产率 荧光量子产率与荧光强度的区别 荧光量子产率是荧光物质的固有属性 其与物质浓度无关 荧光强度与物质浓度有密切关系 同浓度下，荧光量子产率高的荧光越强（排出外界条件影响） 荧光寿命 荧光寿命（τ） lnFo-lnFτ=-t/τ