2016新课标三维人教生物选修3 专题1 1.2 基因工程基本操作程序.docVIP

1．2基因工程的基本操作程序 一、基因工程的基本操作程序 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。 二、目的基因的获取 1．从基因文库中获取 (1)基因文库的含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。 (2)基因文库的种类： ①基因组文库：包含一种生物的所有基因。 ②部分基因文库：包含一种生物的一部分基因。 2．利用PCR技术扩增 (1)原理：DNA双链复制。 (2)过程： 3．人工合成 (1)条件：基因比较小，核苷酸序列又已知。 (2)方法：通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 三、基因表达载体的构建 1．构建基因表达载体的目的 (1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。 (2)使目的基因能够表达和发挥作用。 2．基因表达载体的组成[填图] 四、将目的基因导入受体细胞 1．导入植物细胞 (1)农杆菌转化法： ①原理：农杆菌Ti质粒上的T-DNA可整合到受体细胞的染色体DNA上。 ②适用范围：主要适用于双子叶植物和裸子植物。 (2)基因枪法：常用于单子叶植物。 (3)花粉管通道法：目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。 2．导入动物细胞 (1)常用方法：显微注射技术。 (2)受体细胞：受精卵。 3．导入微生物细胞 (1)方法：感受态细胞法，即用Ca2＋处