生物：2.2《土壤中分解尿素的细菌的分离及计数》教案(新人教版选修1).pdf

课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ★课题目标 （一）知识与技能 利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数 （二）过程与方法 分析研究思路的形成过程，找出共性和差异性 （三）情感、态度与价值观 形成无菌不在的概念，养成讲究卫生的习惯 ★课题重点 对土样的选取和选择培养基的配制 ★课题难点 对分解尿素的细菌的计数 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 （一）引入新课 上节课我们学习了培养基的配置以及接种技术。下面我们来学习如何进行细菌的分离，获得所需要的 目的微生物。 （二）进行新课 1．基础知识 1．1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能 （能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌 将尿素分解为 氨和CO ，这是因为细菌能合成 脲酶 。 2 1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 ，这样 也适用于实验室中微生物的筛选，原理是 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH 等）， 同时抑制或阻止其他微生物生长 。 点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选 择目的微生物。 〖思考1〗在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 葡萄糖 ，提供氮源的的是 尿素 ，琼 脂的作用是 凝固剂 。 〖思考2〗该培养基对微生物 具有 （具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是只有能够 以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 。 1．3 在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 稀释涂布平板法 。除此之外， 显微 镜直接计数 也是测定微生物数量的常用方法。 【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。 公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量 1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 样品稀释液中一个 活菌 。通过统计 平板上的菌落数 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选 择菌落数在 30～300 的平板进行计数。 〖思考3〗从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是 （平均菌落数÷涂布的稀释液 体积）×稀释倍数 。 〖思考4〗利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 恰当的稀释度 。 〖思考5〗第 二 位同学的结果接近真实值。你认为这两位同学的实验需要改进的操作是第一位同学 需设置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新实验。 1．5 统计的菌落数比活菌的实际数目 低 。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只 是 一个 菌落。因此，统计结果一般用 菌落数 来表示。 1．6 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 1．7 对照实验是指除了 被测试 的条件外，其他条件都 相同 的实验。满足该条件的称为 对照组， 未满足该条件的称为 实验 组。 〖思考6〗请设计本实验的对照实验组： 方案 1：其他同学用A 同学的土样进行实验。 方案2：A 同学以不接种的培养基作为空白对照。 2．实验设计 2．1 实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。 2．2 根据图示2－7 填写以下实验流程： 配制土壤溶液 系列稀释 涂布平板与培养 菌落计数 2．3 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm 的近中性土壤中，约70％～80％为细菌。 2．4 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证 4 5 6 3 4 获得菌落数在30～300 之间、适于计数的平板。细菌稀释度为10 、10 、10 ，放线菌稀释度为10 、10 、 5 2 3 4 10 ，真菌稀释度为10 、10 、10 。 2．5 培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在