第四章核酸的化学结构.ppt

第四章 核酸的化学结构 核酸的研究历史和重要性 核酸分类和分布 第一节 核酸的化学组成与结构 二、核酸的基本组成单位-核苷酸 基本碱基结构和命名 核糖和脱氧核糖 几种稀有核苷 腺苷酸及其多磷酸化合物 三、DNA的分子结构 （三）、DNA 的一级结构 核酸分子中核苷酸之间的3 ? -5 ?磷酸二酯键 DNA一级结构的表示法 （四）DNA的二级结构 1、DNA的双螺旋模型特征 2、DNA的双螺旋结构稳定因素 3、DNA的双螺旋结构的意义 DNA双螺旋的多态性 （五）DNA的三级结构 DNA超螺旋结构的形成 核小体盘绕及染色质示意图 组蛋白与DNA的结合 DNA的念珠状结构 四、DNA的一些性质 DNA的紫外吸收光谱 现有纯化的小牛胸腺DNA和牛血清白蛋白溶液各一瓶。请简要写出根据核酸与蛋白质紫外线吸收的特性区分上述两种物质的实验原理。(2011年考题10分) （七）核酸的变性、复性和杂交 Tm：熔解温度（melting temperature） 第二节 RNA的分子结构 (三)、RNA的一级结构 1、tRNA 的结构 2、rRNA的分子结构 3、mRNA的分子结构 真核细胞mRNA的结构特点 第六节 DNA研究进展 HGP的概况 HGP取得的成就 DNA芯片技术简介 人类将进入生物经济时代 问答题 人类46条染色体的DNA总长可达1.7m，经过螺旋化压缩，实际总长只有200nm （一）溶解性 DNA微溶于，水呈酸性，加碱促进溶解，不溶于有机溶剂。 （二）黏稠性 DNA分子很长，形成溶液后呈现黏稠状。 （三）易脆性 僵直具有刚性 （四） 稳定状态 抽干水分状态稳定 （五）两性电解质 （六）DNA紫外吸收光谱 （260nm）核酸组成中的嘌呤、嘧啶碱都具有共轭双键，因此对紫外光有强烈的吸收。 天然DNA 变性DNA 核苷酸总吸收值 1 2 3 220 240 260 280 0.1 0.2 0.3 0.4 波长（nm） 光吸收 1 2 3 作为核酸及其组份定性和定量测定的依据； 以OD260/OD280进行核酸样品纯度的检验。 变性（加热） 探针 杂交（缓慢冷却） 复性（缓慢冷却 退火） 变性：在物理、化学因素影响下， DNA碱基对间的氢键断裂，双螺旋解开，这是一个跃变过程，伴有A260增加（增色效应）,DNA的功能丧失。 复性：在一定条件下，变性DNA 单链间碱基重新配对恢复双螺旋结构，伴有A260减小（减色效应）,DNA的功能恢复。 用于杂交的异源DNA或RNA序列，其核苷酸序列是人工特定的、已知的，经放射性标记的一条链。 加热 部分双螺旋解开 无规则线团 链内碱基配对 能够引起核酸变性的因素有： 温度升高； 酸碱度改变、 pH（11.3或5.0）； 有机溶剂如甲醛和尿素、甲酰胺等； 低离子强度。 DNA的变性过程 Poly d(A-T) DNA Poly d(G-C) DNA的热变性发生在一个很窄的温度范围内，通常将50%的DNA分子发生变性时的温度称为该DNA的熔解温度（解链温度），用Tm表示，一般在70-850C 之间。 Tm的大小与DNA分子中（G+C）的百分含量成正相关，测定Tm值可推算核酸碱基组成及判断DNA纯度。此外与溶液的性质有关. 某些DNA的Tm值 60 80 100 1 .0 1 .4 1 .2 100% A260 t \ 0C Tm Tm Tm 1 2 3 1 2 3 不同来源的DNA单链间或单链DNA与RNA之间只要有碱基配对的区域，在复性时可形成局部双螺旋区，称核酸分子杂交（hybridization）.制备特定的探针（probe）通过杂交技术可进行基因的检测和定位研究。 （ 八）核酸的分子杂交 （一）、 RNA的类型 根据RNA的功能，可以分为mRNA、tRNA和rRNA三种。 1、信使RNA（messenger RNA,mRNA ）占细胞RNA总量的3%-5%， mRNA是蛋白质合成的模板。 2、核糖体RNA（ribosoal RNA，rRNA)占细胞中RNA总量的80%左右，是细胞中核糖体的组成成分，是蛋白质合成的场所。 3、转移RNA（transfor RNA，tRNA ) 占细胞中RNA总量的15%，它的功能主要是携带活化了的氨基酸，并将其转运到与核糖体结合的mRNA上用以合成蛋白质。 (二) RNA的碱基组成 碱基组成：A、G、C、U （A＝U/G≡C）； 稀有碱基较多 多为单链结构 分子较小。 假