土壤中分离纯化细菌实验剖析
微生物的分离与纯化 实验目的、要求 (1)学习并掌握细菌、放线菌、霉菌和酵母菌等四大类微生物的稀释分离、划线分离等技术。 (2)学习从样品中分离、纯化出所需菌株。 (3)了解四大类微生物的培养条件和培养时间。 (4)学习平板菌落计数法(下次实验)。 以细菌为例 实验原理 纯种分离技术是微生物学中重要的基本技术之一。分离:从混杂的微生物群体中获得单一菌株纯培养的方法。纯种(纯培养):一株菌种或一个培养物中所有的细胞或孢子都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。 微生物的分离与纯化技术的应用:分离具有特殊功能的微生物、优良菌种及纯化被污染的菌种等。 土壤是微生物的大本营,混杂着大量的微生物,从中分离可得到只含有这一种微生物的纯培养。 稀释分离法有倾注法和涂布法两种;菌种被其他杂菌污染时或混合菌悬液常用划线法进行纯种分离。 要获得某种微生物的纯培养,还需提供有利于该微生物生长繁殖的最适培养基及培养条件。 微生物四大类菌的分离培养基、培养温度、培养时间详见实验指导书P67表格。细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基,在30-37℃ 温度下培养1-2天。 平板菌落计数——活菌计数 实验材料 菌源:土样10g; 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基; 实验仪器与用具 1)超净工作台、恒温培养箱、酒精灯 2)1000ul及100ul移液枪、1000ul及100ul枪头、无菌1.5
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