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共 39 页 考点整合一:微生物的生长 1.生长曲线的形成条件 (1)菌种:数量上是少量,但不能是一个,若加大接种量能缩短调整期;种类上是一种,可避免不同种细菌之间的竞争。 (2)培养基:恒定容积的液体培养基。恒定容积提供一定的生存环境,但营养和空间是有限的;液体培养基便于测定群体生长,如通过样品推测细菌总数。 (3)培养条件:适宜条件。 (4)菌体数量的测定方法:定期取样。①测细菌的细胞数目:将等量的待测样品与已知含量的红细胞混匀,固定染色,求出细菌与红细胞的比例,计算出单位体积内的细菌数目;②分离出单位体积培养液中的细菌,称重,计算出其中的细胞总重量。 2.解读生长曲线 (1)生长曲线如图: (2)生长曲线四个时期主要内容的比较: 3.研究微生物生长曲线的实践意义 (1)在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短调整期: ①通过遗传学方法改变微生物的遗传特性使之缩短; ②利用对数期的细胞作为“种子”; ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大; ④以适当扩大接种量等方式缩短调整期。 (2)发酵中延长稳定期、提高代谢产物产量的方法——连续培养: ①基本原则:微生物培养过程中不断地补充营养物质和以同样的速率移出培养物。 ②优点:缩短发酵周期,提高设备利用率;便于自动控制;产品质量较稳定。 ③缺点:杂菌污染和菌种退化。 4.影响微生物生长的环境因素 特别提醒: 1.微生物生长速率曲线 2.细菌的生长曲线与种群的增长曲线比较 (1)细菌的生长曲线与种群的增长曲线均以时间为横坐标,但生长曲线纵坐标是细菌数目的对数,增长曲线纵坐标是种群数量。生长曲线可分为四个时期。 (2)生长曲线的“调整期→对数期”与种群数量变化的“J”型曲线相似:“调整期→对数期→稳定期”与种群数量变化的“S”型曲线相似。 (3)生长曲线中,种内斗争最激烈的阶段是隐定期;与无机环境斗争最激烈的阶段是衰亡期;调整期和对数期种内斗争很小;产生初级代谢产物的最佳时期是调整期;产生次级代谢产物的最佳时期是稳定期。 【典例1】 用某种培养基培养谷氨酸棒状杆菌,测得其生长曲线如图甲所示。谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌的代谢产物之一,其合成途径如图乙所示。下列有关叙述,不正确的是( ) A.该培养基是恒定容积的液体培养基,含有五大类营养要素物质 B.谷氨酸脱氢酶是组成酶,谷氨酸在图甲中的各个时期都有合成 C.在图甲中的②时期,谷氨酸棒状杆菌代谢旺盛,种内斗争最激烈 D.在图乙中,谷氨酸脱氢酶被抑制的直接原因是其结构发生改变 [解析] 从生长曲线看,是微生物群体在恒定容积的条件下的生长情况;组成酶在各个时期都可以产生,诱导酶是在一定外界条件下产生的;在稳定期种内斗争最激烈;谷氨酸脱氢酶被抑制的直接原因是其结构发生改变,催化效率降低。 [答案] C 【互动探究1】 (2009·上海卷)在光照下,将等细胞数量的衣藻和大肠杆菌分别接种到只含无机盐的培养液中培养,结果是(虚线和实线分别表示大肠杆菌和衣藻的生长曲线)( ) [解析] 本题考查自养型生物和异养型生物的生长曲线。在没有有机物供应的情况下,明确大肠杆菌的生长状况是解答本题的突破口。大肠杆菌是异养型生物,不能利用无机物制造有机物,只能摄取现成的有机物进行生长繁殖,因此在只含无机盐的培养基上几乎不能生长繁殖,而四个图中只有C符合该结论。衣藻是含有叶绿体的低等植物,能进行光合作用合成有机物,因此能生长繁殖,其生长曲线应近似于“S”型曲线。 [答案] C 考点整合二:发酵工程 一、发酵工程生产产品的流程简图 归纳总结: 1.菌种选育的常用方法比较 2.发酵工程与其他生物工程的比较 二、发酵的影响因素及控制 1.温度 (1)造成的影响:①温度影响酶活性,进而影响代谢速率;②影响生物合成的途径,如金色链霉菌在30°C以下时合成金霉素能力较强,在35°C以上时则只合成四环素;③影响发酵液的物理性质以及菌种对营养物质的分解和吸收。 (2)采取的措施:①要根据生产实际合理控制温度,如最适生长温度不一定是该菌体内生成代谢产物的最适温度。②发酵罐中热量来源于有机物的氧化分解、机械摩擦等,需要通过发酵罐壁、水分蒸发、冷却水等将热量散发出去,最终使发酵罐中的温度保持动态平衡。 2.pH (1)造成的影响:①pH的改变可以影响酶活性,造成细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收和代谢产物的排出;②影响产物种类,如谷氨酸棒状杆菌在pH为酸性时生成乙酰谷氨酰胺而不是谷氨酸。 (2)采取的措施:在微生物的代谢过程中,产生的二氧化碳、有机酸等会引起培养基中pH的降低,某些无机盐的选择性吸收可能会引起pH的上升,pH的改变不利于生产,因此要及时调整。过酸时加Na2CO3等中和,过碱时加稀盐酸等中和。 3.溶解氧 (1)造成的影响:①不同代谢类型的微生物
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