实验四细菌的生理生化及肠杆菌科的鉴别2.pptxVIP

实验四细菌的生理生化试验及肠杆菌科的鉴别、理化因素及生物因素对微生物的影响;一、目的要求;二、实验材料;三、实验内容;3、细菌氧化型与发酵型（O/F）的测定 菌种：大肠杆菌、枯草杆菌 培养基：加有葡萄糖和指示剂（1%溴麝香草酚蓝）的微型发酵管 方法：用接种针将两种菌各加入两支发酵管中，从不同菌里各取一管加入灭菌的液体石蜡，37 ℃正置培养。 产酸（浅绿色 黄色 ）;4、淀粉水解试验 菌种：大肠杆菌、枯草杆菌 培养基：普通营养琼脂平板 方法：一块平板上，一边划大肠杆菌，一边划枯草杆菌，第二天长出菌后，在菌落上滴加碘液。 5、触酶（过氧化氢酶）试验 菌种：大肠杆菌、枯草杆菌 培养基：普通营养琼脂平板 方法：一块平板上，一边划大肠杆菌，一边划枯草杆菌，第二天长出菌后，在菌落上滴加H2O2;（二）肠杆菌科的鉴别（大肠杆菌沙门菌） ;;肠杆菌科的生化试验;3、糖分解试验 微量发酵管：葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖 方法：用接种针挑取菌种后接入发酵管内，用报纸包好口，置培养箱培养。发酵糖产酸：指示剂溴甲酚蓝由紫色 黄色 4、吲哚（靛基质）试验 培养基：蛋白胨水微量管 原理：细菌分解蛋白质中的色氨酸产生吲哚，吲哚与对位二甲基氨基苯甲醛作用形成玫瑰吲哚而成红色。 方法：接种针接种，培养12-24 h后，加入试剂显色 ;5、甲基红（MR）试验 培养基：葡萄糖蛋白胨水 原理：甲基红试验： 分解葡萄糖产生丙酮酸，进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸等使pH下降，含甲基红指示剂的培养基变红 6、VP试验：葡萄糖蛋白胨水 原理：某些菌发酵葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸经多脱羧、氧化等反应生成二乙酰，其与蛋白胨中精氨酸胍基作用产生粉红色化合物 ;7、枸橼酸盐（柠檬酸盐）利用试验 培养基：Simmon氏枸橼酸钠微量发酵管 原理：细菌若能以枸橼酸钠为唯一碳源，磷酸铵为唯一氮源，则可利用枸橼酸钠产生碳酸盐，与利用铵盐产生的NH3反应，形成NH4OH，使培养基变碱，pH升高，指示剂溴麝香草芬蓝由草绿色变为深蓝色。 8、脲酶 培养基：尿素微量发酵管（指示剂：酚红） 原理：细菌分解尿素产生2分子NH4，使pH升高，指示剂变红。 ;;（三）理化因素及生物因素对微生物的影响;;;;;肠杆菌科细菌的鉴别