痰液中多基因检测在肺癌诊断中价值-痰液中多基因检测.PDF

维普资讯 第 22若 第 1期 武汉人学学报 (医学版1 】】年 1月 Ne,．tJcal um t,fWuSanLni,e~ily Jan 21xl1 痰液中多基因检测在肺癌诊断中的价值 吴0军 丁续兰二 胡 克 扬 炯 孕清泉 武汉大学人民医院呼吸内科 ．武汉 430060 摘要 口的：探讨P53、K-la-、PI5、PI6基因在肺癌组织及相应燕液中的改变情况及其联合检 早期诊断肺癌的 价值 方陆：应用P(=H- p-银染法检测59侧肺癌和 】4例肺良性疾病患者话椅组织厦相应痰液中153基因第5—8 外鞋子突变情配：应用PCR-PJLP法对 25例肺腺癌干¨l4例肺 良性疾病组织及lf且应痰液中 K-ra~．基 突变进行 ]愉 删；g．-r,ii用 Pt：R珐植删了所有肺癌和良性疾病组织硬相应痰液中 PI5、P[6基园地台缺失情况 结果：肺癌组织 }1 P53．PI5、PI6基网改变频率分别为 373％、1l9％ 238％。而 良性病变组织中仅 1例Ⅱ}现 PI6摹网缺失 肺癌继 织 件日应痰液 巾l 、K一肼 、PI5、PI6等摹冈的突变摹本 致．P0+05 埘上述基因突变与吸烟关系的分析 显， 吸烟者出现 P53基因和 Ix-ra．基因突变的频率明显高于非吸烟者，P(】01 我们还对4种肿瘤相关基罔联台榆删 在肺癌早期诊断中的价值进行r评估，表明4种基 联合检测敏感度为78％．明显高于单 基因f以阳眭率最高的 P53为例j的敏感度 373％ 结论：I=53基困K-r~s基困和PI5、PI6基周住肺癌组织中突变率相对较高；多基冈联台 检测在肺癌早期诊断中的价值明显优于单基目的检 ；痰液多基困的联合检测可能有助于肺癌的早期诊断 主题词 肺肿瘤；痰液：基因．结构．肿瘤 中图分类号 R?342 分子遗传学研究表明，支气管 E皮细胞 向恶性 筛查提供理论依据 转化过程 中有多种遗传学改变参与，包括 K一 ， 1 材料与方法 P15．RB及 PI6基因等．为肿瘤的筛查提供了 良好的 筻机。遗憾的是在肺癌的众多遗传改变中，尚无一 1．1 病人资料 收集武汉大学人民医院胸外科和 种遗传学改变能成为真正意义 的分子标志物 多 湖北省肿瘤医院胸体科 1997年 5月 ～1998年 l0月 种遗传学改变的联合检测可能使肺癌的早期诊断成 肺癌手术标本及相应痰液各 59例．其中男48例，女 为口_能．．K一一 基因在肺腺癌 中的突变率较高，为肺 1l例．年龄 35～72岁，平均593岁；鳞癌22例，腺癌 癌发生的早期事件 ．可作为肺癌早期诊断的标志物。 25例，腺鳞癌 2例 ．小细胞和大细胞及支气管肺泡癌 P53基 在多种肿瘤 ．尤其是在肺癌 中突变率很高． 各 3例，类癌 l例，肺部良性组织 14例(肺结核 2例． 已成为多种肿瘤的早期分子标志物。新发现的抑癌 肺脓疡 1例．尽量远离癌组织的癌旁组织 11例)。 基因Pl6和P15在肺癌 中的缺失率较高，也有可能 手术标本取下后放^液氮罐中．再放人 一70℃冰箱 成为新的肺癌分子标志物 纤支镜活检或肺泡灌洗 中，痰液留取参照有关文献 ．肿瘤分期按 TN~,I系 为有创检查，某些高危个体不易接受．肺癌或癌前病 统进行。 变产生的一定晕癌细胞或非典型细胞会 随痰液咳 1．2 DNA的提取0 出，这 脱落细胞的遗传学改变可能反映支气管肺 1．3 PCR引物 参照文献 。 组织上皮细胞的遗传学改变 本研究试图通过对肺 1．4 PCRSSCP．银染 参照文献 。 癌患者组织及相应痰液 中 I：53，K． 、P16及与 P16 1．5 PCRRFLP分析 参照文献 定位相同的抑癌基因PI5的遗传学改变的检测，明 2 结果 确痰液叶r脱落细胞的遗传学改变能台反映组织中的 改变情况以及多种遗传学改变的联合检测是否更有 肺癌组织中P53，P15，P16基因