品种和月龄对公猪精液的影响初步研究.doc

品种和年龄对公猪精液的影响初步研究 黄文波 云国兵2 吴克亮* （1.中国农业大学动物科学与技术学院 北京 100193；2.北京中顺景胜养殖有限公司 北京101307） 摘 要：实验对26头杜洛克25头长白猪53头大白猪，共104头，537样本的精液品质进行研究，分析公猪年龄和品种对精液品质的影响和作用，结果表明杜洛克公猪的精子密度高，但精液量少，大白则与其相反，长白。 关键词：精液质量品种公猪年龄 1 前言 公猪的品质直接关系到养猪生产水平的高低，特别是在猪人工授精技术日益推广和普及的，公猪的能配繁殖母猪数量大大提高，公猪的质量则更加的重要，公猪品质的直接体现在精液质量的优劣。 公猪的精液质量通常被认为是衡量公猪繁殖力和公畜效应的代表性指标，在人工授精的实施工作中，精液质量必需检测，其常规指标包括采精量、pH值、精子密度、活力、颜色、活率、畸形率等；例如精子活力是精子直线运动的测量指标直接关系到精子的获能与授精的过程（Petrunkina et al. 2007），而这些指标往往与品种、生产环境、季节、年龄、营养和管理水平等因素有关。 本实验通过对当前北京地区养猪生产的主流品种长白、大白和杜洛克等精液品质进行研究，分析品种、公猪年龄对精液品质的影响，试图为猪人工授精技术的推广以及养猪水平的提高提供理论研究基础。 2 材料与方法 2.1 试剂与仪器 电子天枰（GGTJ3K）、北京试剂厂6.4-8.4范围内的精密pH试纸、载玻片、盖玻片、移液器、显微镜及视频成像设备（粤显MC1180+松下GX7Y-CP280）、5%伊红溶液、1%的苯胺黑溶液、温度计、恒温操作台、生理盐水、95%酒精、5%的龙胆紫溶液、意大利DEMEI精子密度仪（型号：CCXM--018 CXM—004）、计数器。 2.2 实验动物的管理与样本采集 本实验于2011年6月9月在北京中顺景盛养殖有限公司进行。实验动物全部为生产中正常利用的繁殖群种公猪饲养管理条件相同。供的精液样本分别来26头杜洛克25头长白53头大白。所有参试的公猪均有详细的系谱信息，最大年龄为39月龄，最小年龄为11月龄。参试公猪每34天采集精液一次，由两名专业人员采用徒手法进行精液的收集。 2.3 精液品质的测定方法 射精量(VOL)采用电子天枰称重（1g=1mL）。 精液pH值采用6.48.4范围内的精密pH试纸测定。用微量移液枪取少量精液点在试纸上，然后和试纸的比色条比对，判断pH数值。 颜色（COL）采用肉眼评分观察，评分标准为:乳白色或奶白色为3级；灰白色为2级；水样或透明为1级，带有血丝或颗粒状黄白点为0级。 精子活力（MOT）运用光学显微录像技术对精子的活动状态进行录像，人工评级。具体操作方法如下： 用移液器取2μl精液与50μl37℃生理盐水混合后滴于预热的载玻片上，加盖20x20mm的盖玻片，在200倍光学显微镜视野下，分别对2个视野中精子的运动状态录像，3位实验人员观看录像，并采用0～10的10级评分标准打分，直线前进运动的精子为100%者评为10级；90%者为9级，以此类推，计算平均值。 精子活率（VIA）采用伊红-苯胺黑活体染色技术染色，在400倍光学显微镜视野下，计数300个精子，计算出其中所含的活精子数所占比例。死活精子判定标准：死精子着红色，活精子不着色，呈灰白色。 精子畸形率（ABN）采用龙胆紫活体染色技术染色，在光学显微镜400倍视野下，计数300个精子，进行形态结构异常精子统计。 精子密度（DEN）采用精子密度仪进行测定，通过精子密度仪的透光系数计算精子的密度，计算公式：精子密度（106 /ml）=透光系数×1121。 总精子数(TOT)精子密度× 2.4 数据统计分析 用SAS9.1软件的GLM程序对537样本数据分别对品种年龄进行双因素方差分析。 3 结果 3.1 品种对精液品质的影响 对公品种影响猪精液质量进行方差分析结果列于表1，品种之间精液的射精量、pH值、色泽、密度等指标都存在显著性差异(P0.05)精子活力精子活率精子畸形率品种间无显著差异（P0.05）精液H值为大白猪最，精液色泽方面长白最好。射精量白270.98±5.23 ml，长白56.16±9.22 ml均显著高于杜洛克211.43±8.45 ml（P0.05），精子密度杜洛克358.29±12.71 106/ml，长白为344.83±13.87 106/ml均显著高于大白猪284.06±7.86 106/ml（P0.05）总精子数方差分析结果是长白猪81.41±2.73 109显著高于大白猪72.10±1.55 109和杜洛克公猪68.52±2.50 109（P0.05）。表1 品种对公猪精液质量影响 (MEAN±SE) 品种Breed 样本量 Number 精液量 VOL,ml p