动物细胞培养反应器的主要操作模式.pdfVIP

专论与综述 动物细胞培养反应器酌主兽操作模式 朱庆虎1，陈 弘2，秦红丽1，刘兰刚3，康二勇4 (1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨150001； 2．内蒙古乌兰察布市动物疾病预防控制中心。乌兰察布012000； 3．武川县农村改水办公室。武川01 1700； 4．天津市天农大生物技术发展有限公司，天津300402) DoI：10．39691J．ISSN．1671-6027．2010．10．004 反应器细胞培养技术是以反应器悬浮培养动物细胞生 谢毒副产物的累积细胞生长进入衰退期进而死亡，或由于 产或研制生物制品的一种通用的平台技术，可广泛地用于生 细胞内某些酶的作用而使细胞发生自溶现象。表现出典型 的生长周期。收获产物通常是在细胞快要死亡前或已经死 产单抗、人用或兽用疫苗等生物制品。1962年Capsfile成功 地大规模悬浮培养BHK一21细胞，1967年VanWezel成功应亡后进行。 用微载体培养贴壁动物细胞，标志着反应器培养动物细胞技 该方式的特点：(1)操作简单。培养周期短，染菌和细胞突 术的起步。20世纪70年代起，在国外2000～5000L的反应变的风险小。反应器系统属于封闭式，培养过程中与外部环 器悬浮培养BHK一21细胞开始应用于口蹄疫疫苗的生产中。境没有物料交换，除了控制温度、pH值和通气外，不进行其 进入80和90年代，在细胞融合技术和基因工程技术等生物 他任何控制，因此操作简单，容易掌握；(2)直观的反应细胞生 技术发展的基础上，抗体药物迅速发展。极大地推进反应器 长代谢的过程。由于培养期间细胞的生长代谢是在一个相对 细胞培养技术在生物制药中应用，上万升的动物细胞反应器 固定的营养环境，不添加任何营养成分，因此可直观的反应 培养规模和先进的流加培养工艺技术的应用都首先是在抗 细胞生长代谢的过程，是动物细胞工艺基础条件或“小试”研 体生产中获得突破。而国内起步较晚，现只有少数几家疫苗 究常用的手段；(3)可直接放大。由于培养过程工艺简单，对设 生产企业采用反应器细胞培养技术生产疫苗，而且反应器体 备和控制的要求较低，设备的通用性强，反应器参数的放大 积也只是维持在100L、300L或650U1200L。许多设备、技术原理和过程控制，比较其它培养系统较易理解和掌握，在工 等问题还未得到很好的解决，距离产业化的反应器生产工艺 业化生产中分批式操作是传统的、常用的方法，其工业反应 尚有较大差距。为了大家对生物反应器基本操作模式有个比 器规模可达i2000L。 较全面的了解，现综述如下。 经过改进的搅拌式生物反应器，目前仍是大规模培养动 动物细胞大规模培养的操作模式，主要分为分批式操 物细胞用以生产各种药物的主要设备，也是早期用以生产单 作、流加式操作、半连续式操作、连续式操作和灌流式操作等 抗的主要途径。在用搅拌式生物反应器分批式培养单抗中， 五种操作模式。 最多采用的是微囊或巨载体培养。与一般的悬浮培养比较， 1分批式操作 杂交瘤细胞依托微囊化或巨载体后，相对固定化，降低了搅 批式操作是动物细胞规模培养进程中较早期采用的方 拌培养时对细胞的剪切力，提高了细胞的密度和稳定性及生 式，也是其它操作方式的基础。该方式采用机械搅拌式生物 产率。 反应器，将细胞扩大培养后，一次性转入生物反应器内进行 2流加式操作 培养，在培养过程中其体积不变，不添加其它成分，待细胞增