pGEM-T与pGEM-T Easy载体系统.pdf

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2017-06-06 发布于湖北
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® pGEM -T 和 pGEM®-T Easy 载体系统原英文技术手册号码：TM042 产品 A1360 ，A1380 ，A3600 和 A3610 的操作指南。所有技术资料均可在网站上得到，请访问公司网站以证实您所使用的技术手册为最新版本 I. 描述…………………………………………………………………………………….. 2 II. 载体图谱……………………………………………………………………………….. 3 III. 产品组分…………………………………………………………………………….. 6 ® ® 7 IV. 采用 pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体和 2 ×快速连接缓冲液进行连接………. A. 操作步骤………………………………………………………………………… 7 ® ® 7 V. 采用 pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体的连接反应产物的转化………………... VI. 注意事项…………………………….………………………………………………. 8 A. PCR 产物纯度…………………………………………………………………... 8 B. 平端 PCR 产物………………………………………………………………… 9 C. 优化插入片段与载体的摩尔比………………………………………………… 10 D. 有插入片段的转化子的筛选…………………………………………………… 11 E. 实验对照………………………………………………………………………... 11 VII. 重组质粒 DNA 的提取…………………………………………………………….… 12 ® ® VIII. pGEM -T 和 pGEM -T Easy 载体单链 DNA 的制备….………………………… 12 IX. 疑难解答……………………………………………………………………………… 13 X. 参考文献……………………………………………………………………………… 15 XI. 附录A ：载体序列及限制性酶切位点……………………………………………… 16 ® 16 A. pGEM -T 载体序列……………………………………………………………… ® 17 B. pGEM -T 载体限制性酶切位点………………………………………………… ® 18 C. pGEM -T Easy 载体序列………………………………………………………. ® 19 D. pGEM -T Easy 载体限制性酶切位点…………………………………………. XII. 附录 B：参考资料………………………………………………………………….. 21 A. 缓冲液及溶液配方……………………………