鸭坦布苏病毒E基因的克隆表达及初步应用.pdfVIP

浙江农业学报Actα Agriculturae Zhejiangensis , 2012 ,24(5) :782 -786 http://w啊. zjnyxh. cn 杨少艳，于可响，王华，等.鸭坦布苏病毒E 基因的克隆表达及初步应用[JJ. 浙江农业学报，2012 ， 24(5) :782 -786. 鸭坦布苏病毒E 基因的克隆表达及初步应用 杨少艳I 气于可响2 ，王 华2 ，史玉颖2 ，马秀丽2 ，李建亮\崔言顺1 ， • e 山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018;2 山东省农业科学院 家禽研究所，山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室，山东 济南 25∞23 ) 摘 要:利用 PCR 方法从鸭坦布苏病毒山东分离株(BZ 株]扩增整个 E 基因，全长 1503 句，克隆到pMD18-T 载体中，然后将双酶切目的片段亚克隆入 pET-28a( + )载体，构建出重组表达质粒 PET28a-E。将 PET28a-E 转化大肠杆菌B口1 (DE3) 后，经 I町G 诱导可表达出分子量约 54.8 kD 的蛋白，Westem hlotting 试验呈阳性， 表明 E 蛋白有很好的反应原性。以纯化的表达产