《分子生物学》期末复习总结.doc

《分子生物学期末复习总结》 郭 红 双 一至八、内容梗概： 【细菌的基因转移四种机制】 1.接合(conjugation):当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至另一细胞（细菌）的DNA转移。 2.转化(transformation)通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型. 3.转导(transduction):是通过噬菌体将基因从供体转移到受体细胞的过程。 4.细胞融合（cell fusion）:由细胞质膜融合导致的基因转移和重组。 【感受态细胞】受体细胞经过一些特殊方法（如电击、CaCl2）处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性改变，成为能允许外源DNA分子进入的状态。 【转座子（transposon）】 1.概念：是在基因组中可以移动的一段DNA序列，可以转移到细胞基因组的任何位置。 2.转座作用：一个转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程称为转座或移位，或异常重组。 3.转座特点： ① 能从基因组的一个位点转移到另一个位点（又称跳跃基因）； ② 不以独立形式存在； ③ 转座子编码自身的转座酶； ④ 转座的频率很低； ⑤ 转座作用可引起基因表达内容的改变甚至失活。 【插入序列(IS) 】最简单的转座子只含有与转座有关的酶基因，不含有任何宿主基因（包括抗药性基因），常被称为插入序列。IS序列都是可以独立存在的单元，带有介导自身移动的蛋白。 【DNA的三级结构】 1.一级：DNA分子中各核苷之间的连接方式和排列顺序； 2.二级：DNA双螺旋结构； 3.三级：DNA的超螺旋结构。 【染色体的三级结构】核小体——染色质——染色体 九、RNA转录后的拼接与加工 【核内不均一RNA（hnRNA）】 1.概念：是mRNA转录的初始产物，平均分子长度为8-10Kb(2Kb-14Kb)左右，比mRNA的平均长度(1.8-2Kb)要大4-5倍。hnRNA分子经裂解和拼接，只有少部分序列转变为成熟的mRNA，其余在加工过程中被降解。 2.是mRNA前体的证据： (1) hnRNA和mRNA有相同的序列； (2) hnRNA在体外能作为模板翻译蛋白； (3) 两者5′端都有帽子结构； (4) 二者为相同的聚合酶所合成； (5) 两者的3′端都有多聚腺苷尾巴。 3.结构特点： (1) 5′端有帽结构； (2) 3′端有poly（A）尾巴； (3) 帽结构后有3个寡聚U区，每个长约 30nt； (4) 有重复序列，位于寡聚U区后面； (5) 有茎环结构，可能分布于编码区（非重复序列）的两侧； (6) 非重复序列中有内含子区。 4.加工四步骤： （1）5′加帽； （2）3′加尾； （3）切除内含子； （4）修饰：对某些碱基进行甲基化。 【帽子结构（7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp））功能】 ①有助于mRNA越过核膜，进入胞质； ②翻译起始所必要的，为核糖体识别mRNA提供了信号，并协助核糖体与mRNA结合使翻译从AUG开始； ③保护5′不被5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定性。 【尾巴结构（多聚腺苷Poly（A），长约200bp）功能】 1）可能与核质转运有关 2）与mRNA的寿命有关 3）与翻译有关 ，增强翻译效率 【核酶(Ribozyme)】 1.概念：是指本质为RNA或以RNA为主且含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。 2.发现：四膜虫rRNA内含子确实具有酶的催化功能，建立一种崭新的概念“核酶”。 3.与传统酶的区别： (1)一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是RNA或带有蛋白的RNA； (2)核酶既是催化剂又是底物。而酶仅催化反应。 4.意义： （1）突破了酶的概念. 是一种自体催化； （2）揭示了内含子自我剪接的奥秘；促进了RNA的研究。 （3）为生命的起源和分子进化提供了新的依据。 【核内小RNA（hnRNA）】 1.概念：多数真核细胞核内存在的许多种类的小分子RNA，其大小在100-300nt左右，因含有较多的尿嘧啶，因而又被称为U-RNA，又称U-系列。 2.核糖核蛋白（RNP）：hnRNA与几（十）个蛋白质结合形成,称作snRNP.U1,U2,U5和U4/U6snRNP参与hnRNA的剪接. 【RNA编辑（editing）】 1.概念：指转录后的RNA在编码区发生碱基的加入，丢失或转换等现象。 2.特点： （1）是一种与RNA加帽、加尾、剪接不同的RNA加工形式； （2）转录后改变RNA的序列，使成熟RNA的序列与基因组DNA序列不同； （3）生物学中心法则的补充，扩大了mRNA遗传信息容量。 3.意义： (1)校正作用； (2)调控翻译；通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子； (