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色谱 气相色谱 (气-固分离,流动相为载气) 液相色谱 (液-固分离,流动相为液体) HPLC (主要分离非极性的有机化合物) IC (主要分离极性和部分弱极性的化合物) 什么是高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography 高效液相色谱法,简称:HPLC 是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方法的高效能分离手段: 高性能的色谱柱,高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器…… 广泛应用于各个领域: 医药 / 环保 / 石化 / 生命科学 / 食品及农业…… 在技术,理论及应用上仍处于发展阶段 HPLC的仪器配置 HPLC的应用 在兽药研究中分析应用 在医药研究中分析应用 药物分析有USP、BP、CP等标准 常用药物研究中的应用:解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。 甾体药物研究中的应用:肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。 抗菌素类药物研究中的应用:青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。 中草药研究中的应用:生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类 手性药物研究中的应用:光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小,L-异构体毒性很强) 医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。 1.高效液相色谱法与经典液相色谱法 高效液相色谱法比起经典液相色谱法的最大优点在于高速、高效、高灵敏度、高自动化。高速是指在分析速度上比经典液相色谱法快数百倍。 由于经典色谱是重力加料,流出速度极慢;而高效液相色谱配备了高压输液设备,流速最高可达 103cm·min-1. 例如分离苯的羟基化合物,7个组分只需1min就可完成。对氨基酸分离,用经典色谱法,柱长约170cm,柱径0.9cm,流动相速度为30cm3·h-1,需用20多小时才能分离出20种氨基酸;而用高效液相色谱法,只需lh之内即可完成。 2.高效液相色谱法与气相色谱法 (l)气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物,它们仅占有机物总数的20%。对于占有机物总数近80%的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质,目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。 (2)气相色谱采用流动相是惰性气体,它对组分没有亲和力,即不产生相互作用力,仅起运载作用。 而高效液相色谱法中流动相可选用不同极性的液体,选择余地大,它对组分可产生一定亲和力,并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因此,流动相对分离起很大作用,相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数,这为选择最佳分离条件提供了极大方便。 (3)气相色谱一般都在较高温度下进行的,而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。 总之,高效液相色谱法是吸取了气相色谱与经典液相色谱优点,并用现代化手段加以改进,因此得到迅猛的发展。目前高效液相色谱法已被广泛应用于分析对生物学和医药上有重大意义的大分子物质,例如蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、高聚物、染料及药物等物质的分离和分析。 高效液相色谱法的仪器设备费用昂贵,操作严格,这是它的主要缺点。 HPLC与其它分析技术的联用 LC-MS 用于分析痕量有机混合物的仪器 HPLC-AFS(原子荧光法) 实现元素的形态分析不仅是总量分析 HPLC-ICP-MS 根据HPLC的保留时间的差别反映元素的不同形态,ICP-MS作为HPLC的检测器,跟踪待测元素的各种形态变化,使色谱图变得简单,可进行元素形态的定性定量分析。 LC-NMR 推断化合物结构 HPLC-FTIR 结构鉴定 MS GC-MS和LC-MS差别 MS-MS 什么是离子色谱 ? 利用色谱技术测定离子型物质的方法 色谱 : 用于分析的一种分离技术 离子型物质 : 在水溶液中电离,具有 + 或 – 电荷的 元素 阴离子 : Cl-,NO2-,SO42-,CrO42- 阳离子 : Na+,NH4+,Ca2+,Fe3+ 离子色谱 (IC) 是 1975 由H.Small 等人.(Dow chemical)首次提出 用于测定氯离子和硫酸根 许多国家将离子色谱法作为标准方法 中国 : GB 饮用天然矿泉水水检试方法, ; 工业循环冷却水中阴、阳离子的测试方 法 等… 。 美国 : USEPA (US Env. Protect Agency),

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