小鼠骨髓来源树突状细胞的分离及扩增培养.pdfVIP

杂志, 2005, 15(1):29～ 31 C　 　 ★2005　CHINESE JOURNAL OF MICROCIRCULATION 小鼠骨髓来源树突状细胞的分离与扩增培养 　　罗建飞　陈必成　陈忠华 　　[ ] 　R392.12　Q28　　[] 　A　　[] 　1005-1740(2005)01-0029-03 [1] 973Steinman Cohn 。IL-12 1 、 , CD11c、CD80、CD86、 , (Dendritic HCⅡ。 cell, DC)。 (FCS)。(LPS), (Antigen presenting cell, APC), Sigma。-a (TNF-a), , 。 、、, DC APC 1.2　 , 。DC (FACS) Becton Dickson HCⅡ;、 , Olympus 。 ; 1.3　 T , ; C57BL/6 , 6 ～8 , , T ;DC 。 T 。, 1.4　 , C57BL/6 , , 75%5 。DC ～ 10 min, , , , , 、 DC , 15 ml;(1200r/min, 5 DC。 min), 。1∶10 37℃, , 1　 2 ～ 4 min, ; 10%FCS 6 1.1　 RP I 1640 2×10 /ml, (139.6 mmol/L NH Cl, 16.96 , 2～3 h, ;, 4 mmol/L Tris, 1mol/L HClPH 7.2)GKN R PI1640 ( 1 mmol/L (8g/L NaCl, 0.4 g/L KCl, 1.77 g/L Na2PO4, 0. , 2 mmol/L , 10 mmol/L Hepes, 8.9 6 g/L NaH PO , 2 g/L , 0.01g/L ), mmol/L NaHCO , 50 μmol/L , 20 u/L 2 4 3 , , 4℃。 , 20 u/L , 50 ng/L G -CSF 50 8 (G -CSF)-4(IL-4) ng/L IL-4, 20%FCS)10 /L, , PBS 1 mg/L 6 , 1.5 ～2 ml;37 ℃, 5%CO2 , , , -20℃, , , 3 50 ng/L。RP I 1640 , 5 ～7 , , DC。 [] 　, 1.5