DNA测序概述.pptVIP

3. Oxford Nanopore Technologies公司 Oxford Nanopore Technologies公司正在研究的纳米孔单分子技术是一种基于电信号测序的技术。他们设计了一种以α-溶血素为材料制作的纳米孔，在孔内共价结合有分子接头环糊精。用核酸外切酶切割ssDNA时，被切下来的单个碱基会落入纳米孔，并和纳米孔内的环糊精相互作用，短暂地影响流过纳米孔的电流强度，这种电流强度的变化幅度就成为每种碱基的特征。 纳米孔测序技术 与NGS, SMRT等技术相比，纳米孔测序不需修饰DNA或dNTP ,不需要酶和荧光基团、不需荧光检测系统等，具有直接测序和更低成本的潜能，是单分子测序领域的热点之一。 纳米孔测序原理比较简单:在一块膜内嵌入一个直径约为1.5 nm的纳米孔，在纳米孔两端加上一定的电压，在电场力的作用卜，单链DNA分子会通过这个孔并引起电流变化，电流的特征用来标识碱基序列。 尽管有实验表明有些纳米孔系统可以检视出单碱基加成引起的特征电流变化，目前纳米孔DNA测序领域主要有两大障碍。 第一，DNA链通过纳米孔的速度太快(约1个碱基/微秒)，超出了现有检测器的检测范围。 第二，纳米孔的厚度太厚导致单链DNA通过纳米孔时各碱基引起的电流差异特