11第十一章影响动物实验结果的因素.ppt

第二节 动物因素 * 一、种属因素 不同种属哺乳动物的生命现象具有一定的共性，而且种属越近，其生命现象也越接近。这正是在医学实验中可以将动物作为人的模型进行动物实验的基础。 不同种属的动物，在解剖、生理生化和代谢特征上，又各有个性，表现在不同种属动物对同一实验刺激的反应性不同。 吗啡 雌激素 氯贝丁酯 益母草浸膏 为了避免动物种属因素对实验研究的影响，在药物药效学和毒理学试验中规定至少需用两种动物，它们的种属差异愈大愈好。 * 二、品种、品系因素 封闭群动物因保持群体的基因杂合状态，即使是同一年龄、同一性别，动物个体间对同一刺激反应的差异相对较大，表现为数据的离散度较大，但它反映了种属对实验刺激的反应。 因封闭群的群体基因杂合状态与人类比较接近，因而常用于药理学、毒理学研究。 近交系动物因基因高度纯合，动物个体间对同一刺激反应的差异相对较小，表现为数据的离散度较小，因而可以用较少的动物得出具有统计学意义的结果来。 因近交系独特的基因型对实验刺激的反应不能代表了种属的“共性”，因而一般不用于药理学、毒理学研究。 不同近交品系动物由于各自具有独特的基因型，对同一刺激的反应各不相同，甚至差异很大。如： 内源性激素：A系小鼠的促性腺激素含量比DBA小鼠低1.5倍； 外源性激素：C57BL小鼠对肾上腺皮质激素的敏感性比DBA及BALB/c小鼠高12倍； 酶活性：A系小鼠肝脏的β葡萄糖酸活性只有C3H小鼠的十几分之一； 用激素超排卵：C57BL属高排卵品系，而BALB/c属低排卵品系； 物理因素：DBA小鼠对声音刺激非常敏感，35日龄DBA/2N小鼠闻电铃声后可出现特殊的发作性痉挛，甚至死亡，而C57BL小鼠则否； 化学试剂：对相同浓度的氯仿，DBA/2雄性小鼠死亡率为75%，DBA为51%，C3H为32%，BALB/c为10%； 病毒：DBA/2及C3H小鼠对鸡新城疫病毒的反应和DBA/1小鼠完全不同，前者引起肺炎而后者引起脑炎； 自发性肿瘤：C3H、津白Ⅱ等品系小鼠易致癌，C57、C58、津白Ⅰ等品系不易致癌，AKR、DBA/2等品系易致白血病，C3H雌鼠乳腺癌自发率高达90% ，AKR 小鼠白血病自发率可达65%； * * 封闭群的实验数据： 因为群体内个体差异，表现为标准差大，但它反映了种属对刺激的反应。 近交系的实验数据： 因为群体内个体差异极小，表现为标准差小，但同一刺激对不同近交系反应不同，有的高，有的低，它仅反映某个基因型对刺激的反应。 封闭群 近交系A 近交系B 封闭群与近交系实验结果的比较示意图 正常组 实验组 * * 封闭群或近交系的选择 例：某中药复方治疗胆汁性肝硬化的药效学研究，用胆管结扎制备肝硬化模型，用肝功能和病理学指标观察疗效。 此实验用封闭群？用近交系？ 例：进一步观察炎症介质? （IL-1，IL-2）?在肝硬化形成过程中和中药治疗过程中的消长情况， 此实验用封闭群？用近交系？ * 3. 性别因素 性别亦影响实验结果,特别是对药物的毒性作用表现得尤为明显。造成性别差异的原因可能与性激素或肝脏微粒体药物代谢酶的活性有关。一般而言，由性别引起毒性差异较动物种系及个体差异要小。 在实验研究中如无特殊要求，一般宜选用雌雄各半，以避免由性别差异造成的误差。 有的试验刺激并无明显的性别差异，可用单性别动物。 * 4. 年龄/体重因素 订购实验动物时常用体重代表年龄，由于不同品种品系动物体型大小相差很大，同一体重规格在不同品种中代表了不同的年龄。例如18～22克小鼠，ICR小鼠为3周龄，昆明种小鼠为5周龄，而BALB/c小鼠为7周龄，如不注意会影响试验结果。 一般而言，大多数试验采用性成熟后成年动物，幼年动物比成年动物敏感，老年动物反应不敏感，但承受试验刺激的能力降低，易发生死亡。 为了减少个体差异，用于实验的一批动物体重不应超过10%。一个连续性的实验几批动物体重应保持基本一致。 * * 生长曲线的实际应用价值： ①根据年龄判断体重，或根据体重判断年龄； ② 根据生长曲线，选择购买适合实验需要的动物； ③ 根据生长曲线，判断实验刺激对动物生长发育的影响。性成熟前后生长发育最快，而体成熟后生长发育趋缓。因此用性成熟前后动物做实验，如实验因素对动物生长发育有影响，就能很快反映出来。 第三节 饲料营养因素 * 1. 不同种属动物的营养需求 实验动物种属不同，对营养的需求也不相同。 啮齿类动物 豚鼠和兔同属草食类动物，但豚鼠对粗蛋白的需求为18～20%，而兔对粗蛋白的需求为14～17%，两者相差很大。 豚鼠体内因缺乏合成维生素C的酶，需要从饲料中补充足够的维生素C,而兔体内可合成维生素C,不需在饲料中添加维生素C。 * 2. 不同生长发育阶段动物的营养需求