癫痫大鼠海马锌含量与两种锌转运体表达的研究.pdfVIP

癫痫大鼠海马锌含量及两种锌转运体表达的研究 1，2 3 1 4 1 5 5 1 杨丹 ，刘宇 ，王清华 ，李鸿飞 ，孙凤 ，王占友 ，高慧玲 ，蔡际群 1 中国医科大学药物毒理学教研室，沈阳 （110001 ） 2 沈阳医学院药理学教研室，沈阳（110034 ） 3 沈阳市公安局人口信息中心，沈阳 （110001 ） 4 解放军第205 医院，辽宁锦州（110034 ） 5 中国医科大学组胚教研室，沈阳 （110001 ） E-mail ：ld_love415@ 摘 要：目的通过实验研究遗传性癫痫大鼠海马锌含量及两种锌转运体表达的改变与癫痫 发生发展的关系。方法 以原子吸收光谱法检测大鼠海马锌元素含量；应用western blotting 和RT-PCR 技术分析两种锌转运体表达。结果 遗传性癫痫大鼠海马锌含量及锌转运体 1 表 达明显高于对照组，锌转运体3 表达与对照组相比无明显改变。结论 遗传性癫痫大鼠海马 锌元素含量增高可能与癫痫发生发展有关；锌转运体 1 表达上调可能在癫痫发生发展过程中 起到保护神经元的作用。 关键词：癫痫；微量元素锌；锌转运体 1. 引言 锌是人体内重要的微量元素，其代谢紊乱可引起神经系统多种疾病，在一些神经损伤所 致脑疾患中有重要作用。近年来，有关锌对癫痫的发生、发展的作用逐渐受到人们的重视。 动物实验及临床资料表明癫痫的发病与体内锌代谢异常密切相关。 细胞锌转运途径由锌铁调空转运体 ZIP （zrt,irt-like protein ）和助阳离子扩散体 CDF （cation diffusion failitator ）两大锌转运体家族来完成。锌转运体1 （zinc transporter,ZnT-1 ） 为助阳离子扩散体CDF 家族中的一员。ZnT-1 定位于胞浆膜。细胞膜上的ZnT-1 在细胞处 于高锌环境时，可促使胞内锌外排，从而可维持细胞内适宜的锌水平。另外，除Zn2+ 以外的 其他离子成分的改变，如Ca2+ 2+ 2+ + + - ，Cu ，Mg ，Na ，K ，Cl 等，对ZnT-1 的锌外排作用几乎 无影响，说明ZnT-1 对锌的外排不受这些离子的干扰，是专一性的锌转运体[1] 。 锌转运体3 （zinc transporter,ZnT-3 ）是锌离子的专一性转运体。ZnT-3蛋白定位 于突触囊泡膜上，提示其可能参与将锌转入突触囊泡，敲除ZnT-3基因的小鼠在 其囊泡中不出现组化反应锌。ZnT-3促进胞浆内锌富集于囊泡中,一方面避免胞浆 高锌可能产生的细胞毒性,更重要的是通过介导胞浆锌的跨囊泡膜转运,构成囊泡 ‘锌池’,伴某些神经递质(如谷氨酸、GABA等) 释放,调控神经元的信号传导,进而 [2] 参与脑功能调节 。Cole等的研究表明,小鼠ZnT-3基因破坏后,海马神经元囊泡中 锌含量下降,用药物诱发小鼠边缘系统癫痫,发现ZnT-3缺陷鼠对药物的敏感性远 高于正常鼠,更易诱发癫痫,初步揭示了ZnT-3对海马中某些神经元的兴奋性具有 间接抑制作用。而将ZnT-3基因和MT-3基因均切除的小鼠对海人酸所致癫痫的反 [3] 应性与ZnT-3基因均切除小鼠表现相同，提示ZnT-3和MT-3作用于相同路径 。 自发性癫痫大鼠（spontaneously epileptic rat, SER ）为双基因突变大鼠，由Tremor 大鼠 （TRM ）杂合子（tm/+ ）和zitter 大鼠（ZI ）纯合子(zi/zi)杂交得到。出生8 周后，SER 自发 性地出现癫痫大发作和小发作，对于抗癫痫药物的反应同癫痫患者类似，是研究遗