开题报告---马丽红.pptVIP

开题报告 2010级 马丽红 研究课题名称 DNA甲基化在CRC早期诊断中的应用研究 研究目的、意义 结直肠癌(CRC)是目前常见的恶性肿瘤之一，近年来，CRC发病率和死亡率有逐年增高的趋势，我国目前CRC位于恶性肿瘤发病率的第3-4位，而且发病年龄也明显提前，相应治疗费用也在不断增加。作为一种可以根治的疾病，早期发现、早期诊断是提高CRC预后的关键。所以对普通人群展开CRC的诊断筛查有重要的社会和经济价值 当前常用的诊断方法如结肠镜检查、粪便隐血试验(FOBT)、影像学检查等在敏感性、特异性、患者依从性及经济成本上的不足，甚至有可能出现如肠道出血、穿孔等严重的并发症，限制了它们在CRC筛查中的广泛应用 研究目的、意义 随着分子生物学研究进展，技术方法改进，对于CRC，检测粪便中DNA中相关改变，作为一种新的无创检查手段，被推荐为最适合于CRC早期筛查及诊断。早期筛查及诊断不但能降低CRC的死亡率，还可降低其发病率，提高CRC患者存活率 目前国内外对该课题的研究简况 结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，它从良性病变如腺瘤或增生性息肉、锯齿状腺瘤通过多级的组织学进展顺序逐步演变成腺癌。基因改变涉及腺瘤～腺癌演变顺序的特定阶段并促进大肠癌的组织学进展 目前国内外对该课题的研究简况 研究表明，结直肠的发生、发展甲基化研究是遗传学变异和表观遗传学修饰共同作用的结果，异常的基因甲基化似乎与遗传改变促使结直肠息肉和腺瘤起始并进展成大肠癌，其中抑癌基因启动区CpG岛的高甲基化状态会影响基因的表达，使基因表达下降或失表达，早期大量的研究已经证明这是肿瘤中抑癌基因失活的重要方式，并且，基因的异常甲基化在早期腺瘤向进展期腺瘤进展过程中似乎显著增加，且有的发生率比较高，甲基化检测相对于突变检测的简单方便 目前国内外对该课题的研究简况 粪便中的脱落细胞持续存在，且DNA在粪便中较为稳定，Belshwa等首先证实粪便DNA甲基化检测用于CRC早期诊断的可行性，Muller等的研究结果进一步证实粪便DNA甲基化检测用于CRC的早期诊断具有良好的应用前景。美国癌症协会认为检测粪便DNA分子是最适合于CRC早期诊断的方法，结合目前的PCR技术，检测粪便中基因异常甲基化状态有较高的敏感性、特异性，且操作相对简单，具有无创易被接受等特点，因此检测异常甲基化可能为非侵袭性检测大肠癌提供一种新的策略 目前国内外对该课题的研究简况 目前关于粪便中基因甲基化运用于CRC筛查的研究比较有限，仅有多个研究机构先后进行检测粪便中DNA甲基化改变筛查大肠癌的可行性研究，以及大肠癌早期病变腺瘤患者粪便中DNA甲基化改变的研究，这些实验性研究报道粪便单个基因甲基化改变在检测大肠癌中的敏感性为42％-77％，在腺瘤中的敏感性为3l％-67％，特异性为63％一100％。这些研究结果表明粪便DNA甲基化可成为大肠癌的敏感诊断工具，但目前的鉴别标志的敏感健和特异性用于大肠癌早期筛查并不乐观 目前国内外对该课题的研究简况 超甲基化筛查早期大肠癌这一领域需要进一步的研究，重点是鉴别更具有敏感性和特异性的甲基化标记或用多个甲基化标记以提高这个方法的整个敏感性和特异性，随着近年来对CRC的发生途径的进一步研究，不断有学者提出新的CRC发生途径，CRC的发生、发展是一个多因素、多基因、多途径共同作用的结果。因此认为必须联合参与多种发生机制的多种甲基化基因的检测才可获得理想的敏感性，而增加检测基因必然降低特异性，这就要求即相关基因的甲基化仅发生于结直肠肿瘤，而不存在于正常粘膜及其他胃肠道疾病中 目前国内外对该课题的研究简况 有研究表明，在结直肠癌组织中T淋巴细胞成熟相关蛋白(MAL)基因启动区的甲基化率为80％，结直肠腺瘤为7l％，在甲基化阳性的标本中其蛋白不表达或表达明显降低；细胞周期依赖性激酶抑制因子2A(CDKN2A)是一种多肿瘤抑制基因．其甲基化在结肠癌早期就已经出现，且与P53基因表达呈负相关，另有研究认为CDKN2A启动子甲基化与患者复发及转移有关；6-氧-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)是一种DNA修复酶，研究显示，结直肠肿瘤中MGMT启动子区CpG岛存在过甲基化，导致MGMT表达缺失，不能修复基因损伤而引起肿瘤的发生 研究内容 1、DNA甲基化在CRC肿瘤组织及癌旁组织中的差异 2、DNA甲基化与现有肿瘤标志物的一致性 3、DNA甲基化在癌组织、轻中重度不典型增生、正常组织中的差异 4、不同来源标本（组织、血清、粪便）DNA甲基化 研究条件 充足的实验对象 齐全的实验设备 足够的资金资助 取材简便、无创、易行 研究方法 (1)试验对象 从2012年9月至2013年2月期间在吉林大学白求恩第一医院门诊及住院的CRC