SERODIA-TP·PA梅毒螺旋体抗体SOP〔181〕.docVIP

广西壮族自治区疾病预防控制中心 SERODIA—TP·PA梅毒螺旋体抗体 明胶凝集试验标准操作细则 （日本富士，FUJIREBIO INC.） 版号：第2003年版 文件编号：GXCDC/Y16-13-181 1、目的 对SERODIA—TP·PA梅毒螺旋体抗体明胶凝集试剂使用进行必要的细化和补充，以规范本试剂的操作程序，正确使用本试剂,保证检测结果准确。 2、适用范围 操作适用于采用SERODIA—TP·PA梅毒螺旋体抗体明胶凝集试剂的所有操作。 3、职责 科室负责人：负责对科室综合管理。 保管人员：负责对SERODIA—TP·PA梅毒螺旋体抗体明胶凝集试剂使用操作是否符合规范，并对SERODIA—HIV明胶凝集试剂进行使用效期记录。 使用人员：负责按照本细则对SERODIA—TP·PA梅毒螺旋体抗体明胶凝集试剂使用操作，并进行使用记录。 4、工作程序 （一）、原理 利用纯化的致病性梅毒螺旋体（Nichol株）抗原包被明胶颗粒，此致敏的明胶颗粒将与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合产生可见的凝集反应。 本试剂有如下优点： （1）操作简便，无需特殊设备。即可对单个标本进行检测，也可用于大规模普查。 版号：第2003年版 文件编号：GXCDC/Y16-13-181 （2）反应时间短：孵育时间仅2小时，随后肉眼观察结果。 （3）高度特异性：本试验中所用的载体为人工制造的明胶颗粒，由富士公司独创。与其它同类试剂中所用的生物载体相比（如TPHA中的红细胞），最大限度地降低了非特异凝集反应。 （二）、试剂盒内容 “A”溶解液（Reconstituting Solution）：用于溶解致敏颗粒“C”和非致敏颗粒“D”。 “B”标本稀释液（Sample Diluent）：用于标本的稀释。 “C”致敏颗粒（Sensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。是包被有梅毒螺旋体抗原的明胶颗粒。 “D”非致敏颗粒（Unsensitized Particles）：为冻干粉，用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀。 “E”阳性对照（Positive Control）：为含梅毒抗体的兔血清制成，最终滴度1:320。其试验方法与定量试验同，可稀释至第7或第8孔则可。必要时才做此对照试验。 滴管（25μl /滴）：2个或4个，分别用于致敏颗粒（“C”液）或非致敏颗粒（“D”液）的吸取，请勿混用。 本试剂有数种包装规格，内容如下表。 试 剂 规 格 A B C D E 100人份/盒（20×5） 8ml×1 29ml×1 0.6ml*×5 0.6ml*×5 0.5ml×1 220人份/盒（55×4） 18ml×1 60ml×1 1.5ml*×4 1.5ml*×4 0.5ml×1 550人份/盒（110×5） 18ml×2 60ml×2 3ml*×5 3ml*×5 0.5ml×1 600人份/盒（300×2） 18ml×2 60ml×2 8ml*×2 8ml*×2 0.5ml×1 注：“C”或“D”均为冻干粉，用前需加“A”液溶解。标*号的量即为每瓶“C”或“D”中应加“A”液的量。“C”或“D”液溶解后最好当天和完，否则胶带封口后置4℃可保存一周。 版号：第2003年版 文件编号：GXCDC/Y16-13-181 需实验者自备的材料：U型微孔板，刻度吸管，微量移液器及吸头，托盘式混匀器（注：不可用涡旋式振荡器） （三）、试验方法：用U形反应板 1、定性试验 孔序 1 2 3 4 加血清稀释液“B”（μl） 100 25 25 25 血清标本 （μl） 25 → 25 → 25 → 25 → 弃去25μl 标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40 加非致敏颗粒“D”（μl） 25 致敏颗粒 “C”（μl） 25 血清终滴度 1:40 1:80 置微型振荡器振摇1分钟，置有盖