热量限制对心肌细胞的影响.docxVIP

作者】周卉芬；【导师】王伟；【作者基本信息】汕头大学，心血管内科学， 2010，硕士【摘要】目的:1.研究SIRTs(SIRT1-7)在大鼠心脏组织及H9c2心肌细胞的定位;2.初步探讨热量限制对心肌细胞SIRT1-7表达的影响。方法:3个月龄健康雄雌SD大鼠20只,随机分成两组:①正常对照组(ad libitum,AL)(n=10):随意进食;②热量限制组(Calorie Restriction,CR)(n=10):喂养量为对照组的60%,分别称体重。饲养3周后称体重,用质量分数2 %的戊巴比妥麻醉后处死,取出心脏,称重,沿心脏纵轴平均分为三份,心尖及心底部用于Western blot,对比两组SIRT1-7蛋白表达水平的变化;中间部分心脏用于免疫组织化学,定性检测SIRT1-7在大鼠心脏组织的定位。大鼠心肌细胞株H9c2在含葡萄糖4.5g/L的DMEM培养基中培养48h后传代随机分为两组:①正常对照组(Control,Con):继续在含葡萄糖4.5g/L的DMEM中培养;②热量限制组(CR):弃去旧培养液,加入含葡萄糖1g/L的DMEM。两组细胞在5% CO2、37℃条件下继续培养24h后终止。免疫细胞化学法定性检测SIRT1-7在H9c2的定位; RT-PCR法检测SIRT1-7 mRNA表达水平的变化。结果:1.实验前两组大鼠两两体重的差别无统计学意义。心脏质量指数(HMI