第一章细胞全能性与形态发生.pptVIP

第一节 细胞全能性及其表达 细胞工程的核心是在培养条件下调控细胞全能性表达 一、细胞全能性 1839，Schwann：低等植物的任何细胞均能从植物体分离并继续生长。 细胞全能性（cell totipotency）：一个生活细胞所具有的产生完整生物个体的潜在能力。 动植物细胞都有全能性。 细胞全能性学说：作为高等植物器官和组织基本单位的细胞，有可能在离体培养条件下实现分裂和分化，乃至形成胚胎和植株。 不同细胞全能性差异 理论上，任何一个生活细胞都有全能性，但要首先回复到分生状态或胚性细胞状态。不同细胞回复能力不同。 合子及早期胚胎细胞均为胚性细胞。 植物胚胎干细胞：植物顶端分生组织细胞具有较强表达全能性能力。 完全失去分裂能力的细胞，如细胞核开始解体的筛管和木质部部分不能回复全能性。 三类植物细胞 茎尖、根尖、形成层细胞—周期细胞 导管、筛管、气孔保卫细胞等特化细胞，终端分化细胞。 表皮细胞及各种薄壁细胞。受外界刺激后可重新启动分裂，称为G0细胞。 “生理脱离”效应：in vivo, 细胞全能性不表达；in vitro，可再生。 外在调控：细胞的脱分化和再分化。 细胞或组织的离体培养技术就是细胞脱分化和再分化的控制过程。 全能性表达的基本前提：与母体的分离、激素的调控 二、培养条件下的细胞脱分化 脱分化是细胞全能性表达的前提 再分化是细胞全能性表达的最终体现 脱分化（dedifferentiation)：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生 细胞状态的过程。 细胞脱分化过程中的生理活动与细胞结构变化 细胞质显著变浓，大液泡消失 核体积增加并逐渐移位至细胞中央 细胞器增加 其中细胞脱分化的重要特征：液泡蛋白体的出现，质体转变为原质体。 细胞开始脱分化的标志：蛋白体的出现，同时细胞质密度增加。 细胞脱分化的3个阶段 1、启动阶段：细胞质增生，开始向细胞中央伸出细胞质丝，液泡蛋白体出现 2、演变阶段：细胞核向中央移动，质体转变为原质体 3、脱分化终结期：回复到分生细胞状态，细胞分裂即将开始。 细胞脱分化调控机理 2001，诺贝尔生理及医学奖得住Hartwell、Hunt、Nurse发现了cyclin、CDK、CKI。 CDK 引擎 Cylin 油门 CKI 刹车 激素的作用 激素是离体培养的必须条件，与植物激素相关的基因表达是启动细胞脱分化的关键。 激素并不直接作用于DNA而导致特定基因的激活，而是需要受体蛋白及其它信号转导过程的参与。 生长素感应：植物细胞感受生长素的信号时通过生长素受体和生长素分子相结合，使生长素受体被活化来完成。 细胞分裂与愈伤组织形成 多数情况下，细胞脱分化后进入细胞分裂的结果是形成愈伤组织，但不是脱分化必然形成愈伤组织。 愈伤组织内细胞并不均一。 脱分化是细胞生理状态的改变，形成愈伤组织是离体培养中的一个阶段。 三、细胞分化 细胞分化（differentiation）：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 再分化（redifferentiation）：离体条件下，细胞脱分化后，无序生长的细胞及其愈伤组织重新进入有序生长再生为个体的过程。 再分化过程事实是基因选择性表达与修饰的人工调控过程。 管家基因与奢侈基因 管家基因（house keeping gene）：维持细胞最低生命活动的基因，如组蛋白基因 奢侈基因（luxury gene）：与细胞行使特殊功能有关的基因，常在一定条件下大量表达。 细胞分化从基因调控水平上来说即是奢侈基因选择性表达的结果。 极性与细胞分化 极性（polarity）：植物细胞分化中一个基本现象。 细胞的不均等分裂是细胞极性建立的标志。 极性生长的重要原因：细胞内不同方向Ca+梯度分布。 激素在细胞分化中的作用 生长素能刺激木质部的发生。 生长素和细胞分裂素对于细胞生长和分化具有协同作用，不同的量比配合对细胞分化有重要的调节作用。 内源激素水平的差异使得对外源激素的反应不同。 先生长素后分裂素，利于细胞分裂；反之，利于分化。 植物细胞离体培养再生两条途径 1、器官发生（organogenesis） 2、体细胞胚胎发生（somatic embryogenesis) 第二节 器官发生 植物的离体器官发生：培养条件下的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根（adventitious roots）、不定芽（adventitious shoots）等器官的过程。 一、离体培养中器官发生的方式 1、先芽后根，较为普遍。 2、先根后芽。 3、愈伤组织的不同部位形成芽和根，再通过维管组织的联系形成完整植株。 二、愈伤组织离体再分化器官的3个生长阶段 1、外植体经诱导形成愈伤组织。