二细胞核的分离.pptxVIP

二、细胞核的分离与鉴定; 细胞核的鉴定，因为细胞核中主要含DNA，而DNA是碱性蛋白，因此将分离出来的核体经三氯醋酸处理后，屏风，抽提掉核酸后，用碱性固绿染色，可使细胞核内碱性蛋白呈现出来。 实验步骤： （1）、 用颈椎脱臼法处死小白鼠，迅速解开其腹腔取出肝脏，去出结缔组织，剪成小块，尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中。反复洗涤尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。;（2）、将湿重为1g的肝组织放入烧杯中，用量筒取8ml预冷的0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L的CaCl2溶液，先加少量溶液于烧杯中，尽量剪碎肝组织后全部加入。 （3）、将剪碎的肝组织导入匀浆管中，使匀浆器下端侵入盛有冰块的器血中，左手持，右手将匀浆捣杆垂直插入管中，上下转动研磨3-5次。用3层纱布过滤于匀浆管中，然后制备一张涂片①，自然干燥。; （4）、将装有滤液的离心管配平后，放入普通离心机以2500r/min离心15min,弃去上清液。 （5）、用6mol 0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L的CaCl2溶液悬浮沉淀物，以2500r/min离心15min 弃去上清液，将残留液体用气管吹成悬液，滴一滴于干净的载盖玻片上，制成涂片②，自然干燥。;（6）、固定，将制备好的涂片放入70%的乙醇中固定5min,晾干。 （7）、三氯醋酸处理，将已固定的涂片侵入90℃5%的三氯醋酸溶液中处理2