农产品分析蛋白质测定-3-1.pptxVIP

1 第五章 蛋白质的测定 2 蛋白质的测定方法 pro的测定方法分为两大类： 一类是利用pro的共性，即含氮量，肽链和折射率测定pro含量; 另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定pro含量。 蛋白质用凯氏法测定，因其中尚有氨基酸、酰氨等非蛋白质氮，故称“粗蛋白质”，若用重金属盐等沉淀分离以后，进行全氮测定，由氮换算成的蛋白质含量，则称为“纯蛋白质”。 3 测定蛋白质最常用的方法为凯氏定氮法 凯氏定氮法是通过测定出样品中的总氮含量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量。经过人们长期的应用和不断改进，凯氏定氮法已演变成常量法、微量法、半微量法、改良凯氏法及自动定氮法等。 4 优点： 具有应用范围广、灵敏度高、回收率好及不需昂贵仪器等优点。 缺点： 操作较费时(除自动凯氏定氮法外)，单消化过程一般就需要2～3h，如果遇到高脂肪、高蛋白样品消化需要5h以上；在操作过程中会产生大量有害气体。 5 为满足生产单位对工艺过程快速控制分析，减少环境污染和操作简便省时，后来在凯氏定氮法的基础上又陆续出现了水杨酸比色法、双缩脲法、水合茚三酮法、染料结合法、紫外分光光度法、折光法、旋光法、近红外线光谱法以及测定开氏消煮液中铵的靛酚蓝法和纳氏比色法。 6 重点介绍凯氏定氮法、染料结合法、双缩脲法 三种方法。 测定氨基酸主要的方