小鼠孕孕粤员重组腺病毒的构建与在胰岛茁细胞中的表达.PDF

第猿源 卷第愿 期 南京医科大学学报渊自然科学版冤 20员源 年愿 月 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJ ING Natural Science 冤 员园员怨 小鼠 粤员 重组腺病毒的构建及在胰岛茁 细胞中的表达 月 张 许 韩 晓鄢 渊南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室袁江苏 南京 圆 园园圆怨冤 摘 要暂 目的院构建小鼠孕孕粤 重组腺病毒袁观察重组腺病毒在小鼠胰岛和茁鄄栽悦远 细胞中的表达袁以及对脂肪酸引起的胰岛 茁 细胞凋亡的影响遥方法院将目的基因孕孕粤 插入到腺病毒 梭质粒责粤凿贼则葬糟噪鄄悦酝灾 中袁质粒经孕悦砸 鉴定正确后用 皂藻 玉酶切线 性化袁转到含有腺病毒骨架责粤凿藻葬泽赠鄄 的月允缘 愿猿 细菌中进行同源重组袁重组成功的质粒经 葬糟 玉酶切线性化后转染匝月陨鄄圆怨猿粤 细胞袁经包装得到粤凿鄄孕孕粤 腺病毒遥 根据绿色荧光蛋白渊郧云孕冤检测病毒滴度和感染效率遥 用病毒感染小鼠胰岛和茁鄄栽悦远 细胞袁 以宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼 法检测孕孕粤 蛋白表达水平遥 匀燥藻糟澡泽贼 染色法检测孕孕粤 对细胞凋亡的影响遥 结果院 重组腺病毒载体责粤凿藻葬泽赠鄄 孕孕粤 经酶切鉴定确认构建成功袁将责粤凿藻葬泽赠鄄孕孕粤 转染匝月陨鄄圆怨猿粤 细胞袁观察细胞病变效应提示病毒成功包装遥 重组腺病毒能 够有效感染小鼠胰岛和茁鄄栽悦远 细胞并成功过表达孕孕粤 蛋白遥 匀燥藻糟澡泽贼 染色结果表明过表达孕孕粤 可保护脂肪酸引起的胰岛 茁 细胞凋亡遥 结论院成功构建携带小鼠孕孕粤 基因的重组腺病毒袁并证实过表达孕孕粤 具有抗凋亡的作用袁为进一步研究孕孕粤 在 胰岛茁 细胞中的功能奠定了基础遥 关键词暂 孕孕粤员曰腺病毒载体曰胰岛茁 细胞 中图分类号暂 匝圆缘苑 文献标志码暂 A 文章编号暂 园园苑鄄源猿远愿渊圆园员源冤园愿鄄 园 怨鄄园远 凿燥蚤院 园援苑远缘缘辕 晕再阅载月晕杂圆园员源园愿园源 悦燥灶泽贼则怎糟贼蚤燥灶 燥枣 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 葬凿藻灶燥增蚤则怎泽 糟葬则则赠蚤灶早 皂燥怎泽藻 孕孕粤员 早藻灶藻 葬灶凿 蚤贼泽 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 责葬灶糟则藻葬贼蚤糟 茁鄄糟藻造造 在澡藻灶早 再怎藻袁在澡葬灶早 载怎袁匀葬灶 载蚤葬燥鄢 渊允蚤葬灶早泽怎 则燥增蚤灶糟藻 运藻赠 蕴葬遭 燥枣 匀怎皂葬灶 云怎灶糟贼蚤燥灶葬造 郧藻灶燥皂蚤糟泽 袁晕允酝哉袁晕葬灶躁 蚤灶早 圆员园园圆怨袁悦澡蚤灶葬冤 咱Abstract暂 Obj ective 院栽燥 糟燥灶泽贼则怎糟贼 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 葬凿藻灶燥增蚤则怎泽 糟葬则则赠蚤灶早 皂燥怎泽藻 孕孕粤 早藻灶藻袁葬灶凿 凿藻贼藻糟贼 蚤贼泽 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 皂燥怎泽藻 蚤泽造藻贼泽 葬灶凿 茁鄄栽悦远 糟藻造造泽袁葬灶凿 燥遭泽藻则增藻 蚤贼泽 藻枣枣藻糟贼 燥灶 枣葬贼贼赠 葬糟蚤凿鄄蚤灶凿怎糟藻凿 责葬灶糟则藻葬贼蚤糟 茁 糟藻造造 葬责燥责贼燥泽蚤泽援 酝藻贼澡燥凿泽院栽澡藻 贼葬则早藻贼 早藻灶藻 燥枣 孕孕粤 憎葬泽 糟造燥灶藻凿 蚤灶贼燥 贼澡藻 泽澡怎贼贼造藻 增藻糟贼燥则 责粤凿贼则葬糟凿鄄悦酝灾援 粤枣贼藻则 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 孕悦砸袁贼澡藻 责造葬泽皂蚤凿 憎葬泽 造蚤灶藻葬则蚤扎藻凿 遭赠 皂藻 玉葬灶凿 则藻糟燥皂遭蚤灶藻凿 憎蚤贼澡 遭葬糟噪遭燥灶藻 责粤凿藻葬泽赠鄄 蚤灶 月允缘 愿猿 遭葬糟贼藻则蚤葬援 栽澡藻 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 责造葬泽皂蚤凿 憎葬泽 造蚤灶藻葬则蚤扎藻凿 遭赠 葬糟 玉藻灶扎赠皂藻泽 凿蚤早藻泽贼蚤燥灶袁贼则葬灶泽枣藻糟贼藻凿 蚤灶贼燥 匝月陨鄄 圆怨猿粤 糟藻造造泽袁葬灶凿 责葬糟噪藻凿 枣燥则 粤凿鄄孕孕粤 葬凿藻灶燥增蚤则怎泽援 粤糟糟燥则蚤灶早 贼燥 贼澡藻 早则藻藻灶 枣造怎燥则藻泽糟藻灶贼 责则燥贼藻蚤灶 渊郧云孕冤袁贼澡藻 贼蚤贼藻则 葬灶凿 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 则葬贼藻 憎葬泽 凿藻贼藻糟贼藻凿援 栽澡藻 皂燥怎泽藻 蚤泽造藻贼泽 葬灶凿 茁鄄栽悦远 糟藻造造泽 憎藻则藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 遭赠 则藻糟燥皂遭蚤灶葬灶贼 葬凿藻灶燥增蚤则怎泽 葬灶凿 贼澡藻 责则燥贼藻蚤灶 造藻增藻造 燥枣 孕孕粤 憎葬泽 凿藻贼藻糟贼藻凿 遭赠 宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼援 月赠