清肺培元颗粒对免疫低下肺部感染小鼠模型T淋巴细胞亚群、IL-12、TNF-α的影响.pdfVIP

讨论 22 1 祖国医学对免疫功能的认识 22 1.1 从“脾为枢机、脾旺不受邪”认识免疫功能 22 1.2 元气与免疫功能的关系 25 2 现代医学对免疫功能的探讨 25 2.1 胸腺、脾脏与免疫功能的关系 25 2.2 T 淋巴细胞亚群与免疫功能的联系 26 3 祖国医学对肺部感染的认识 26 4 现代医学对肺部感染的探讨 26 5 免疫低下所致肺部感染的免疫介质和炎性介质的生成及调控 27 5.1 白介素12 （IL- 12 的）作用机制 27 5.2 肿瘤坏死因子（TNF-α）的作用机制 28 6 动物模型的建立及评价 28 6.1 免疫低下模型建立以及评价 28 6.2 以免疫低下为基础的小鼠肺部感染模型建立以及评价 29 7 清肺培元颗粒的组方用药特点 29 7.1 药义解析 30 7.2 清肺培元颗粒各组成药的现代药理研究 28 8 实验研究结果与分析 29 8. 1 清肺培元颗粒对小鼠体重、胸腺、脾脏的影响 29 8.2 清肺培元颗粒对小鼠T 淋巴细胞亚群百分比的影响 30 8.3 清肺培元颗粒对小鼠 IL- 12、TNF-α 的影响 31 8.4 清肺培元颗粒对小鼠肺脏病理学改变 32 9 存在问题及展望 33 结论 34 致谢 37 参考文献 38 附录1 流式细胞图片 39 附录2 肺脏病理图片 45 附录3 文献综述 49 附录4 在校期间论文论著和科研情况 56 摘要 摘要 目的： 通过建立免疫低下肺部感染小鼠模型，探讨清肺培元颗粒对免疫低下肺部感 染小鼠的免疫功能以及肺功能的影响，阐述清肺培元颗粒对防治免疫低下肺部感 染的作用机理，为清肺培元颗粒临床应用以及疗效评价提供实验依据。 方法： 1 动物分组：将 90 只清洁级近交系 BALB/c 雌性小鼠，随机分为九组，每组 10 只，即正常对照组、Friend 鼠白血病病毒组 （FLV 组）、模型组、齐多夫定组(AZT 组) 、唐草片组、清肺培元颗粒加左氧氟沙星组( 中西药组) 、清肺培元颗粒高剂量 组、清肺培元颗粒中剂量组、清肺培元颗粒低剂量组。 2 动物造模与用药：适应性喂养 3d 后，除正常组外其他各组腹腔注射 0.5ml 的 FLV 病毒悬液，观察 21d ，21d 后鼻腔滴注Ⅲ型肺炎链球菌，建立免疫低下肺部 感染小鼠模型。根据体表面积换算法计算出各组小鼠的给药剂量，在造模成功 1d 后，各组小鼠每天灌胃给予相应的药物干预，正常对照组、FLV 组、模型组给予 0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 水灌胃，给药体积为0.2ml·10g- 1 ，其它治疗组给予 相应的药物灌胃。末次给药前 12 小时动物禁食，不禁水。 3 指标测定：实验中观察记录小鼠的一般状况，末次给药6 小时后，摘眼球取血， 处死解剖小鼠取胸腺、脾脏及肺脏，并称胸腺及脾脏的质量，计算胸腺指数、脾 + 脏指数；用流式细胞仪检测 T 淋巴细胞亚群百分比即 CD4 T 淋巴细胞百分比、 + CD8 T 淋巴细胞百分比，计算 CD4/CD8 比值。酶联免疫吸附法检测小鼠血清中 IL- 12、TNF-α 含量，光镜下观察小鼠肺组织苏木素-伊红(HE)染色后病理学改变。 结果： 1 成功复制免疫低下肺部感染小鼠模型，各治疗组可明显改善小鼠的一般状 态。 2 对免疫低下肺部感染小鼠体重的影响：与模型组相比，除清肺培元颗粒低 剂量组外，清肺培元颗粒高剂量组、清肺培元颗粒中剂量组以及其他各治疗组均 能一定程度的增加小鼠体重，差异有统计学意义 （P0.05 ）。与 FLV 组相比，清 肺培元颗粒高剂量组、AZT 组、中西药组、唐草片组均能一定程度的增加小鼠体 重，差异有统计学意义 （P0.05 ）。 3 对免疫低下肺部感染小鼠胸腺质量、胸腺指数的影响