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显微镜调节使用一般步骤 为了观察和拍摄好图像，需要对 微镜和CCD 以及CCD 软件都 要求进行调节，以满足不同的观察方法。 在进行 微观察和摄影前，首先要做的就是对 微镜进行调节。 调节项目包括柯勒照明、相差环调节、荧光中心调节等。其中后两项 一般在安装是已经调节好，以后一般情况下就不需要再调节了。 柯勒照明调节方法如下： 1，放一张你即将观察的样本，使用明场照明状态（聚光镜转轮选择H 或 BF 荧光滤镜轮选择空位 DIC 附件全部拉出光路，照相光路转换到观察状态） 10X 物镜，通过粗调和微调将其调节到样本能观察到的最清楚的状态。然后 不要再动调焦螺旋。 2 ，将视场光栏和孔径光栏调到最小的状态，如果显微镜的调节状态正确的话 此时在视野中应该可以看到一个边缘清楚的多边形。 如果看到的不是一个边缘清楚的多边形 则说明光路中的聚光镜上 位置不 准确 此时通过调节聚光镜左手侧的上 调节旋钮使得视场中形成一个边缘 清晰的多边形 此时的聚光镜位置就是最佳位置 以后的调节或观察的时候 都不要再移动其位置了。 3，视野中的多边形的正确位置应该是在视野的正中心，如果不在说明光路有偏 移 需要调节柯勒照明光路调节旋钮 （聚光器对中螺钉）通过调节聚光镜上 的柯勒照明光路调节旋钮 （两个银色的旋钮）使多边形在视野的中心。 4 ，将视场光栏慢慢放大 当多边形正好外切于视场的时候就是视场光栏的最佳 工作位置。在此过程中其他位置的调节不可以再动。 调节好柯勒照明基本上就可以正式观察和拍照了。 明场 任何染色的片子 拍摄明场图像主要就是考虑白平衡和平场问题。因此显微镜的调节也要围绕这两个方 面来调节。 显微镜可能需要设置主要有以 部分：（先调节好柯勒照明） 1 将荧光滤镜轮转到空位 聚光镜转轮位置也放在空位 （O、BF 或H ）一定不要使用 PH 或C 或D 2 透射光滤光片除了GIF （绿色）外建议均使用 〔NCB （日光平衡片）一定要使用〕 这样就不用提高电压也可以提高色温，使得背景光为白色。 3 放入需要观察的片子，调节调焦装置，使得图像最清楚。 4 聚光镜孔径光栏的位置要和物镜的数值孔径一一对应 这样观察的图像的对比度才 是最佳的效果。记住每一个换一个物镜都要改变其位置。 5 使用相机拍摄一张图片 看看是否偏色和光场不匀。如果偏色那么就使用相机带的 白平衡设置软件来进行白平衡设置。如果光场不匀那么使用相机软件中的平场校正 来校正 相差 没有染色的活细胞等 拍摄相差图片主要考虑的就是相差环和物镜的配合。显微镜主要状态设置如下： 1 荧光滤镜轮转到空位 聚光镜孔径光栏打到最大位置 （或PH 位置）。 2 聚光镜转轮要根据物镜来选择使用哪一个 4X 使用PHL 10X 和20X 使用PH1 40X 使用PH2 100X 使用PH3 。这些都写在物镜上。 3 透射光滤光片除了GIF （绿色）外均使用 〔NCB （日光平衡片）一定要使用〕 这 样就提高色温，使得颜色更好一些。 4 拍摄相差时就可以直接拍摄黑白图像。因此可以使用相机的黑白模式来拍摄。 5 使用相机拍摄一张图片，看看是否光场不匀，如果光场不匀那么使用相机软件中 的平场校正来校正 相差环的调节方法如 ： 工具：调中望远镜（倒置显微镜一般集成到目镜中） 相差显微镜安装完成后 先调节柯勒照明 然后将目镜取 换上调中望远镜 （或使 用目镜筒中集成的伯兰特透镜），将物镜和其对应的相差环放入光路，调节调中望远镜的高 低 直至可以清楚的看到一个黑色的圆环和一个亮的圆环。调节的目的就是将这两个环重合。 调节是通过调节聚光镜上的相差环上的调节螺丝来完成的。 荧光观察和拍摄 观察和拍摄荧光主要就是通过滤镜轮来选择不同的激发光来激发样品。对显微镜来说 一般不需要进行调节。显微镜主要状态设置如下： 将所需要的荧光滤光块放入光路，选择所要使用的物镜 关闭透射光照明 打开荧光 光闸 直接观察就可以了。透射光光路的设置对荧光观察不起任何作用。不需要对其作调节。 DIC 观察 DIC 作为一