分子生物实验备考资料.docx

专题一、核酸的分离纯化及电泳检测 专题二、PCR技术及基因克隆 专题三、Real Time PCR技术及其应用 专题四、核酸测序与人类基因组计划 专题五、基因芯片与转录组测序 专题六、分子杂交技术及其应用 专题七、双向电泳与质谱检测 (可手动补充) 分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学，是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。 专题一、核酸的分离纯化与电泳检测 掌握核酸分离纯化的原则； 保持核酸结构的完整性（防止降解） 尽量排除其它分子的污染，提高纯度 掌握核酸提取的基本步骤； 核酸的释放（裂解细胞、释放核酸） 核酸的分离纯化（1）加入SDS（2）加入浓盐溶液（如NaCl）（3）酚/氯仿抽提 核酸的浓缩、沉淀与洗涤(沉淀是浓缩核酸最常用的方法, 常用的有机沉淀剂 乙醇、异丙醇、聚乙二醇) 核酸与蛋白质的结合力主要是正负静电吸力(核酸与碱性蛋白的结合)、氢键和非极性的范德华力。 掌握核酸浓度和纯度的检测方法； 1 紫外分光光度法鉴定核酸 1）紫外分光光度法测DNA和RNA的含量 2）紫外分光光度法分析纯度 2 荧光光度法鉴定核酸 1）测定核酸含量 2）