第八章 微生物的遗传变异与育种3.ppt

第三节 基因重组和杂交育种 （1）完全普遍转导 简称普遍转导或完全转导（complete transduction）。经转导嗜菌体的媒介而获得了供体菌DNA片段的受体菌，外源DNA在其内进行交换、整合和复制，使其成为一个遗传性状稳定的重组体，称作普遍转导子，这种现象就称普遍转导。 Salmonella typhimurium（鼠伤寒沙门氏菌） 的野生菌株 Salmonella typhimurium（鼠伤寒沙门氏菌） 的营养缺陷型突变株 P22嗜菌体 供体菌 受体菌 转导模型 供体菌 受体菌 转导媒介—嗜菌体 误包 转导颗粒 普遍转导子 双交换 同源配对 10-6～10-8 S.typhimurium的P22噬菌体、 E.coli的P1噬菌体、 Bacillus subtilis的PBS1和SP10等噬菌体 都能进行完全普遍转导。 供体菌 转导媒介——嗜菌体 受体菌 （2）流产普遍转导 简称流产转导（abortive transduction）。经转导嗜菌体的媒介而获得了供体菌DNA片段的受体菌，外源DNA在其内既不进行交换、整合和复制，也不迅速消失，而仅进行转录、转译和性状表达，这种现象就称流产转导。 受体菌 外源DNA 细胞分裂 外源基因经转录、转译而形成的少量酶 获得外源DNA 获得少量酶 不断稀释 特点：在选择培养基平板上形成微小菌落 DNA不能复制，因此群体中仅一个细胞含有DNA， 而其它细胞只能得到其基因产物，形成微小菌落。 普遍性转导的三种后果： 进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组交换而形成稳定的转导子。 流产转导（abortive transduction） 转导DNA不能进行重组和复制，但其 携带的基因可经过转录而得到表达。 特点：在选择培养基平板上形成微小菌落 外源DNA被降解，转导失败。 DNA不能复制，因此群体中仅一个细胞含有DNA， 而其它细胞只能得到其基因产物，形成微小菌落。 2.局限转导（specialized transduction， restricted transduction） 指通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中，并与后者的基因组整合、重组，形成转导子的现象。 最初于1954年在E. coliK12中发现。 特点： ① 只局限于传递供体菌核染色体上的个别特定基因，一般为噬菌体整合位点两侧的基因； ② 该特定基因由部分缺陷的温和噬菌体携带； ③ 缺陷噬菌体的形成方式是由于它在脱离宿主染色体过程中，发生低频率（～10-5）“误切”（不正常切离，abnormal excesion）或由于双重溶源菌的裂解而形成；④ 局限转导噬菌体的产生要通过UV等因素对溶源菌的诱导并引起裂解后才产生。 局限转导 低频转导 高频转导 根据转导子出现频率的高低分类 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上 宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时，在前噬菌体二侧的少数宿主基因因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒。 但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力，感染受体细胞后，通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子。 E. coli的λ嗜菌体和φ80嗜菌体具有局限转导的能力。 3.溶源转变（lysogenic conversion） 正常的温和噬菌体感染其宿主而使其发生溶源化时，因噬菌体的基因整合到宿主核基因组上，而使宿主获得了除免疫性外的新遗传性状的现象，称溶源转变。 一个与转导相似又不同的现象 溶源转变与转导的不同？ a）这是一种不携带任何外源基因的正常时菌体； b）是嗜菌体的基因而不是供体菌的基因提供了宿主的新性状； c）新性状是宿主细胞溶源化时的表型，而不是经遗传重组形成的稳定转导子； d）获得的性状可随嗜菌体的消失而同时消失； （三）接合（conjugation，mating） 　　 供体菌（“雄性”）通过性菌毛与受体菌（“雌性”）直接接触，把F质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象，称为接合。通过接合而获得新遗传性状的受体细胞，就是接合子（conjugant）。 * * 　　凡把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起，经过遗传分子间的重新组合，形成新遗传型个体的方式，称为基因重组（gene recombination）或遗传重组（genetic recombination），简称重组。 细胞水平 遗传物质 分子水平上的杂交 杂交（hybridization） 重 组 细胞水平的杂交包含分子水平上的重组。