样品要求.docVIP

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样品要求

样品要求 送样要求 样品类型 送样量 运输条件 PCR product 体积 ≥50 ul,浓度≥50 ng/ul或总量 ≥ 2 ug 冰袋运输 基因组DNA ≥2 ug 冰袋运输 cDNA ≥2 ug 冰袋运输 Total RNA ≥5 ug 干冰运输 用以抽提总RNA或基因组DNA的细胞 ≥ 107 cells 干冰运输 Blood cells 起始血液量≥ 500 ul 浸泡在Trizol中干冰运输 含质粒的菌液 甘油菌液 ≥ 500 ul 冰袋运输 Tissue ≥ 10 mg tissues 1. 干冰运输(两天以上的运输路程建议放5Kg以上的干冰) 或液氮运输;2. 匀浆后浸泡在Trizol中干冰运输 protein 总量≥100ug,浓度≥2 ug/ul 1. 如果蛋白在裂解液中,请加蛋白酶抑制剂,然后干冰运输;2. 如果蛋白已经在SDSloading buffer 中,冰袋运输 用以进行细胞培养的活细胞 参见具体项目合同 1. 未复苏细胞由液氮中取出后,直接置于干冰容器中快递运输;2. 已复苏的细胞如果是贴壁细胞,请在分瓶待细胞贴壁后,加满培养基常温运输。如果是悬浮细胞,分瓶后加满培养基,常温运输。注意:分瓶密度不要过高。 抗体 参见具体项目合同 运输请参照生产厂家的说明书,对需4度贮存的抗体请用冰袋运输;对需 -20度贮存的抗体请用干冰运输。 ? 附一. 组织样品的取样和制备方法: 直接以干冰保存和运输 直接取新鲜的组织样品,采样时液氮中速冻后保存于 -80 冰箱中,并使用液氮或干冰运输。 以Trizol保存和运输 (1)植物组织:植物叶片直接放入研钵中,加入少量液氮,迅速研磨成粉末,每50-100mg植物叶片加入1ml TRIzol,并使用干冰运输。 (2)动物组织:按10-30mg组织加入1ml TRIzol,用电动匀浆器或者一次性研磨杵充分匀浆,并使用干冰运输。 ? 附二. 血液样品的取样和制备方法: 直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10,000 rpm离心1分钟。彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml TRIzol,并使用干冰运输。 ? ? 实验技术服务的样品准备要求 ? 为了确保您的实验成功率,从样品准备的每个实验步骤开始,我们尽可能把关每个细节,从而让您的实验更顺畅,按部就班的程序或许略显累赘、班门弄斧之嫌,但保障实验成功是我们永远的初衷。 市客户,我们将安排专业人员上门取样。市外的客户如果您测的是ELISA和RIA指标,建议您用生物冰袋将您的样品包裹后装在泡沫冰盒里,用报纸等填充物将样品和冰袋塞实,然后通过当地的快递公司。如样品用来做RT-PCR,Western Blotting,Realtime PCR,原位杂交等实验的客户,考虑到样品来之不易、样品中蛋白极其容易降解等原因,敬请严格按照相关要求寄送样品。 客户提供的特别样品,必须保证未携带HIV、甲型和乙型肝炎或其他传染性疾病病毒。 【使用RNA later试剂】 1. RNAlater试剂应用于新鲜组织样品的保存和运输,加入RNAlater前切勿冰冻组织。 2. 所用组织样品必须切至厚度在0.5cm以下(长宽不限),然后放入5倍体积的RNAlater中。小型器官例如大鼠的肝、肾和脾可以完整保存在RNAlater中。 3. 4度孵育过夜,然后转入-20度中保存,样品在-20度中不会冻结,但是溶液中可能有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。冻存样品也可以反复冻融,其RNA含量和完整性不受影响。 4. RNA later处理的样品可用常规冰袋4度低温运输(无需使用干冰运输)。 【使用Trizol试剂】 1. 每50-100mg组织加1ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品。 2. 匀浆的裂解液-70度保存或干冰运输。Trizol处理的样品冷藏4度5天内运输亦可 【哺乳动物培养细胞适用于实时荧光定量PCR、RT-PCR实验】 悬浮细胞 1. 离心收集细胞沉淀去上清。 2. 细胞沉淀中(1×107个细胞)中加入1ml的Trizol试剂。 3. 反复吸打几次,-70度保存或干冰运输。(Trizol处理的样品冷藏4度5天内运输亦可) 贴壁细胞 1. 从培养容器中吸出并弃去培养液。 2. 细胞沉淀中(1×107个细胞)中加入1ml的Trizol试剂。 3. 反复吸打几次,-70度保存或干冰运输。(Trizol处理的样品冷藏4度5天内运输亦可)【免疫印迹实验(western blotting)的样品准备】 悬浮细胞 约1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入1mlPBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,-70度保存或

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