生物化学（王金福）BB[04].pptVIP

四、DNA的复性与分子杂交 ?复性；变性DNA在适当条件下，两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象，称为复性。热变性DNA经缓慢冷却后即可复性，也称为退火（annealing）。 ? DNA复性速度受温度的影响。复性时温度缓慢下降才可使其重新配对复性。如加热后将其迅速冷却至4 ℃以下，则不可能发生复性。比Tm低25℃为DNA复性的最佳条件。 核酸的分子杂交(hybridization): 加热 双链DNA 单链DNA 杂交 杂化双链 在DNA复性过程中，双链分子的再形成既可以发生在序列完全互补的核酸分子之间,也可以发生在碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间，这种现象称为分子杂交。 四、沉降特性 在超离心机强大引力场中，不同构象的核酸沉降速度 差异很大： RNA闭环形质粒DNA开环形及线形DNA蛋白质 离心后，用注射针头从离心管侧面在超螺旋DNA 区带部位刺入，收集这一区带的DNA。用异戊醇抽提收集到的DNA 以除去染料，然后透析除CsCl，再用苯酚抽提1~2 次，即可用乙醇将DNA 沉淀出来。这样得到的DNA 有很高的纯度，可供DNA 重组、测定序列及绘制限制酶图谱等。在少数情况下，需要特别纯的DNA 时，可以将此DNA样品再进行一次氯化铯密度梯度超离心分离。 第七节 核