钠钙交换体1型通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞和神经纤维组织中的表达.pdfVIP

20 1 6 年 0 9 月 中国民康医学 Sep,2016 第 2 8 卷 半 月 刊 第 1 7 期 Medical Journal of Chinese Peoples Health Vol.28 Semimonthly No.17 【基 础 研 究 】 钠 钙 交 换 体 1 型 通 道 蛋 白 在 人 牙 髓 成 牙 本 质 细 胞 和 神 经 纤 维 组 织 中 的 表 达 王发生 ( 北华大学附属医院口腔科，吉 林 吉 林 132013) 【摘 要 】 目 的 ：探讨钠钙交换体1(N CX1)型通道蛋白在人牙髓成牙本质细胞和神经纤维组织中的表达，进一步解释牙髓组织的修复 和传感功能 . 。方 法 ：选取就诊患者因正畸减数或阻生拔出的新鲜健康第三磨牙2 4 颗。取牙髓行牙本质涎磷蛋白抗体染色、改 良 Bielschowsky 银染色以分别定位成牙本质细胞层、神经组织 ; 用特异性抗体染色分析NCX1在人牙髓组织成牙本质细胞层、神经组织中的表达情况。结 果 : 免疫组化染色显示，人牙髓成牙本质细胞胞体和神经组织的NCX1型通道蛋白均为阳性表达。Image-Pro Plus 6. 0 半定量分析显示，牙冠部和 牙根部上段成牙本质细胞中的NCX1型通道蛋白表达水平分别为0.152 依0. 023 0.135±0. 020,、 两者差异无统计学意义（t= 1.425,P = 0. 352 )。 结 论 :人牙髓组织成牙本质细胞层及神经组织中均存在明显的NCX1型通道蛋白表达，其在牙冠部及牙根部上段牙本质细胞中的表达差异不 明显。 【关 键 词 】 人牙髓成牙本质细胞; 神经纤维 ; 通道蛋白;钠钙交换体 d oi: 10. 39 6 9 /j. issn. 1672-0369. 2016. 17. 018 中 图 分 类 号 ： R78 文 献 标 识 码 ： B 文 章 编 号 ： 1 6 7 2 -0 3 6 9 (2 0 1 6 )1 7 -0 0 3 8 -0 3 钠钙交换体 （N C X ) 通道蛋白是位于细胞膜上的 1.2.2免疫组化染色切片脱蜡后采用微波加热 一种双向转运体, 能够以3 : 1 的比例将细胞膜内外 法修复抗原;50 ml/L H2O2去离子水中孵育15 min ; 的 N a +和 C a 2+进行正/反向转运 ，介导 C a 2+内流和外 滴加鼠抗人牙本质涎磷蛋白单抗（1:50),4益下孵 排 。多数情况下, N C X 将胞内的C a 2+以正向转运的 育 16 h ;加人兔抗人NCX1通道蛋白多克隆抗体（1: 方式转至细胞外 ，进而调节胞内的C a 2+浓度, 影响细 100),室温下孵育30 min ;光学显微镜下监控DAB 胞的功能活动及发育[1]。相关研究显示 ，大鼠的成 显色，苏木素复染15 s ,常规脱水至透明，封片。用 牙本质细胞和牙髓神经中均存在N C X , 说明其可能 PBS 缓冲液代替一抗作阴性对照。用 Olympus BX 参与到牙本质形成和神经感觉[2]。N C X 1 为 N C X 中 51光学显微镜观察、拍照，用 Image-Pro Plus 6. 0 软 表达最广泛的一种亚型 ，但目前相关研究多以动物 件半定量表达水平。 细胞为基础 ，本次研究旨采用免疫组化法研究人牙 1.2.3 H E 染色和改良 Bielschowsky银染色 HE 髓组织的N C X 1 通道蛋白的表达及分布特点 ，进一 染色:切片烘烤后常规脱蜡,H E 染色，乙醇脱水透明 步解释牙髓组织的修复和传感功能 。 后用中性树脂封片，常温下晾干待用。 Bielschowsky 1 资 料