细胞超微标技术.ppt

表1 TUNEL细胞计数 图3 MTT细胞生长活性曲线 结果：当SPIO标记浓度低（5.6 mg/L）时，细胞生长不受影响但转染效率较低（60％），无法满足MRI示踪的要求；浓度高（22.4 mg/L）时符合MRI示踪要求，但标记物对细胞产生毒性，影响其生长；浓度11.2～16.8 mg/L时，既不影响细胞生长，也能达到较好的转染效率。 结论：SPIO标记浓度在11.2～16.8 mg/L范围内时为最佳，标记效率较高且不影响细胞的体外分化培养。 * 正常细胞质膜表层较为平坦，有绒毛状突起 扫描电镜显示纳米材料的形状和粒径 ZnO NPs细长棒状，TiO2呈球形 * * 由图可见，ZnO NPs作用于星形胶质细胞后，与细胞膜表面发生相互作用，引起细胞膜表面囊泡结构增加，提示ZmO NPs可能被囊泡包被而内吞进入细胞 * * 细胞膜表面囊泡结构急剧增加，提示纳米材料对细胞膜表面造成刺激后，细胞产生大量囊泡，通过内吞作用转运入细胞（如何验证其内吞？） * * Quiescent microglia are large, 8-10 micrometer phagocytic cells with many oval-shaped mitochondria visible in their cytoplasm. An early (6 h exposure) response of microglia to 2.5 ppm P25 was the elaboration of numerous pseudopodia which engulfed small groups of electron-dense particles (*). (C) Within 18 h postexposure, multiple vacuoles containing P25 aggregates were seen in proximity to pale-staining, swollen mitochondria. (D) Higher magnification showed swelling and disruption of mitochondria lying in close proximity to the aggregates. Image magnification: (A) 4400; (B) 11 400; (C) 4400; (D) 18 000. * * 磁性－荧光多功能复合微球制备原理图 首先制备磁性Fe3O4纳米粒子，通过柠檬酸钠对其表面进行改性后稳定分散于水中。由于四氧化三铁纳米粒子表面存在两性羟基，而正硅酸乙酯（TEOS）在水中极易水解，生成SiO2，[6、7] 本实验利用 TEOS在 Fe3O4粒子表面的水解形成稳定网状交联的 SiO2层，以获得分散性良好的胶体溶液；同时，包被层的存在可以有效防止Fe3O4的氧化。[8] 由于SiO2表面含有丰富的羟基，通过EDC（多肽缩合反应的水溶性碳二亚胺型缩合剂）可将羧甲基壳聚糖上的羧基与羟基进行缩合反应，[9]从而将羧甲基壳聚糖包覆在Fe3O4@ SiO2上。[10]另外由于羧甲基壳聚糖含有游离氨基,在酸性条件下能结合氢离子,从而使壳聚糖带正电，通过正负电吸附作用可将带负电的量子点吸附在羧甲基壳聚糖上。 然后，通过戊二醛交联羧甲基壳聚糖的游离氨基，可形成性质稳定的交联产物[11]最后形成以磁性粒子为核，量子点/壳聚糖层为壳的磁性－荧光多功能复合微球。 * Epitope：抗原表位(分),表位(核),抗原决定部位,抗原决定簇 * 3-氨基丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane, APTES), 自组装制备Fe3O4@Au复合纳米粒子用于固定化 葡萄糖氧化酶 . 科学通报。2009 年 第 54 卷 第 4 期: 430 ~ 435 细胞超微标记示踪技术 前言 近十几年来，国际上创造出许多细胞超微标记与示踪的细胞化学新技术，因而可以进一步定性、定位和定量地分析某些特定的化学成分、物质结构及其功能意义。 用各种高电子密度的离子、分子或颗粒显示组织、细胞的通透性、孔径、通道或屏障以及某种带负电荷结构。 IF: 12.186 (2011) Chithrani et al. Nano Lett. 2006 Dependence of cellular uptake of gold nanoparticles as a function of size The graph of number of gold nanoparticles per vesicle diameter vs nanoparticle size Chi