“瘦肉精”监测技术要点及注意事项.pptVIP

1.空白样品 2.标准溶液 克伦特罗，纯度为98.5% 莱克多巴胺，纯度为97.0% 沙丁胺醇，纯度为99.5% 3.标准溶液配置 均购自德国Dr. E公司 标准品 称取适量标准品分别于10mL棕色容量瓶中，甲醇定容，稀释成1000 μg/mL的标准储备液。 分别吸取适量标准储备液至100ml容量瓶中，用纯水定容，稀释成200μg/L，放于4℃冰箱中保存备用。 生猪屠宰场采集并经LC-MS/MS法检测为不含待测物的空白猪尿。 -20℃保存备用 序号 测试药物 测试药物浓度（μg/L） 1 盐酸克伦特罗 0，2，3，5，8，10，15 2 莱克多巴胺 0，3，5，8，10，15，20 3 沙丁胺醇 0，4，5，8，10，15，20 根据试纸条所标注的灵敏度及预实验结果，每种试纸条选择7个浓度（n=6）进行敏感性和重复性测试，并进行批内重复试验（n=3）和批间重复试验（n=3） 各检测试纸条灵敏度、重复性测试浓度 灵敏度、重复性测定 * * 稳定性 2-8℃和室温保存性试验 37℃和-20℃老化试验 将待测的3类胶体金检测试纸条在60℃的烘箱中保存（根据报道，胶体金免疫检测试纸条60℃条件下保存一天，相当于常温保存一个半月，以此类推。），分别于第2、4、8天后取出（分别相当于常温保存3、9、12个月），选择不同浓度的猪尿添加样品进行试验（ n≥6 ）。 试纸条种类 测试药物浓度（μg/L） 盐酸克伦特罗 莱克多巴胺 沙丁胺醇 盐酸克伦特罗 ― 20、50 20、50 莱克多巴胺 20、50 ― 20、50 沙丁胺醇 20、50 20、50 ― 选择两个浓度的含结构相似物的猪尿添加样品进行试验（n=7），各厂家的三种检测试纸条具体选择猪尿添加样品及浓度如下表，判断检测试纸条的特异性。 检测试纸条特异性测试浓度 特异性测定（交叉反应实验） 高度特异，不与其他两种结构相似的“瘦肉精”发生交叉反应 假阳性 结果显示： 盐酸克伦特罗、莱克多巴胺的胶体金检测试纸条有高度特异性，不与其他两种结构相似的“瘦肉精”发生交叉反应； 而沙丁胺醇检测试纸条对低浓度的盐酸克伦特罗有不同程度的交叉反应，说明沙丁胺醇检测试纸条特异性稍差，在临床检测时要注意避免容易发生交差反应的药物所引起的假阳性结果。 * * 用胶体金试纸条检测经LC-MS/MS测试为阴性和阳性样品。 假阳性/阴性率的计算： 假阴性/阳性率=Nf/Nt ×100％ Nf—错检阴性或阳性猪尿样个数 Nt—已知阴性或阳性猪尿样个数 假阴性和假阳性实验 与仪器检测结果比对 抽取经LC-MS/MS确证过的尿液、猪肉、猪肝、猪肾等样品各50份，用胶体金快速检测卡进行检测。考察与仪器检测结果阳性样品符合率。 “在快速筛查技术研究中，国内外的一个基本原则是‘绝不能有假阴性，但允许有假阳性’，也就是说，快速筛查为阴性的样品，肯定不应含瘦肉精，而筛查为阳性的样品，可以有误判。” 河南农科院张改平院士接受中央电视台采访时谈到： 三、检测场所的选择 检测试剂的要求 生物安全的要求 检测的环境温度要求： 室温，20℃~25℃ 适宜的工作环境 规范 有秩序 准确 可追溯 疑似阳性样品的处理 疑似阳性 确证 有资质的检测机构 移送公安机关 * * “瘦肉精”监管关键点控制 * * 中国动物卫生与流行病学中心 赵思俊 瘦肉精？ 瘦肉精与兽医工作的关系？ “瘦肉精”监管关键点控制 * * “瘦肉精”?? “瘦肉精”最初是盐酸克伦特罗的俗称 1964年由美国氰胺公司首次合成，作为一种治疗呼吸道疾病的药物。 20世纪80年代初，美国研究人员意外发现盐酸克伦特罗可以促进动物机体蛋白质合成和肌肉组织生长，减少脂肪尤其是皮下脂肪的沉积，从而提高瘦肉率和饲料转化率。之后，美国开始将其用于畜禽养殖，并逐渐推广到世界其他国家，并于20世纪80年代末传入我国。 * * * * 盐酸克伦特罗 专 指 泛 指 泛指养殖业非法使用的 具有促进动物生长、提高 瘦肉率的含β-肾上腺能 受体激动剂类的一类物质 我国禁止瘦肉精的种类 第176号公告（二〇〇二年二月九日） 第193号公告（二○○二年四月九日） 第235号公告（二〇〇二年十二月二十四日） 第1519号公告（二〇一〇年十二月二十七日） * * 第176号公告：盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、莱克多巴胺、盐酸多巴胺、西马特罗、硫酸特布他林 第193号公告：克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗及其盐、酯及制剂 第235号公告克仑特罗、沙丁胺醇、西马特罗及其盐、酯及制剂 * * 第1519号公告 苯乙醇胺A、班布特罗、盐酸齐帕特罗、盐酸氯丙那林、马布特罗、西布特罗、溴布特罗、酒石酸阿福特罗、富马酸福莫特罗、盐酸可乐