第三章第一节第二节、生物化学检验常用技术.pptx

第三章 生物化学检验常用技术;;一、吸收光谱分析法;4;;;7;8;9;10;11;A = KLC;摩尔吸光系数;Lambert-Beer定律适用于: 可见光、紫外光、红外光和均匀非散射的液体以及分散均匀的固态或气态样品.;5、Lambert-Beer定律的应用;17;18;19;20;21;22;23;24;25;26;27;28;29;30;31;5.标准溶液设置的浓度范围足够大。;33;火焰光度法是以火焰为能源使金属元素激发后发射出特征谱线的特点进行检测的分析方法。 它是一种简化的发射光谱分析法。;火焰光度法的特点;1.共存元素的干扰：共存元素、阴离子、阳离子的干扰 2.火焰对测定的影响：火焰的纯度和燃烧状态的稳定性 3.标准品的影响：成分复杂，相互影响;六、散射光谱分析法;38;39;第二节 电化学分析技术;电化学分析方法;一、电化学分析方法基本原理;电极电位;电极电位测量;离子选择性电极（ISE）; 离子选择性电极的类型和品种很多，外形也差异很大；但基本结构都包括：对特定离子有选择性响应的薄膜(敏感膜或传感膜)、内参比溶液与内参比电极。 敏感膜将内侧参比溶液与外侧的待测离子溶液分开，是电极的关键部位。 ;; ;玻璃膜电极;（2）玻璃电极及膜电位： 玻璃电极是最早使用的离子选择性电极。 玻璃薄膜是决定电极性能的最重要组成部份。 内参比电极的电位是恒定的，与被测溶液的PH无关。 玻璃电极用作测PH的指示电极，是因为跨越玻璃膜产生了膜电位。膜电位与待测溶液PH值有关。 ;（3）玻璃电极的优点;气敏电极; CO2 + H2O === HCO3- + H+ NH3 + H2O === NH4+ + OH- SO2 + H2O === HSO3- + H+ 2NO2 + H2O === NO3- + NO2- + H+ H2S + H2O === HS- + H3O+ HCN + H2O === H3O+ + CN- HF + H2O === H3O+ + F- ;;; 配制一系列已知活（浓）度的欲测离子的标准溶液，逐一插入离子选择性电极和参比电极，测出它们相应的E值，以E对C作图得标准曲线。在同样条件下测出未知溶液的E值，即可从标准曲线上查出对应的欲测溶液的离子活（浓）度。 ; 当待测溶液的成份比较复杂，离子强度比较大时，难以配制与待测溶液组成相近的标液，此时，采用标准加入法较适宜。 ;（三）、仪器直读法 该法是能在离子计上直接读???被测离子的浓度，这种仪器称为专用离子计。例如：PH计、氟离子计等。;60;61;电解质分析法在临床检验中的应用 ;;一、电泳分析技术的基本原理;电泳迁移率;66; 溶液的酸碱度决定被分离物质的解离程度和带电性质及所带净电荷量。pH与pI差值越大，粒子带电量越多。;缓冲溶液的离子强度影响缓冲容量、电泳速度和产热效应;4、支持介质;二、常用电泳技术及应用;按电泳支持物分类;(五) 等电聚焦电泳 (IEF);谢谢