第十一章 蛋白质的生物合成2015.ppt

* * * * * * 进位 转位 成肽 核蛋白体循环的反应过程 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 核蛋白体沿mRNA链滑动，不断使多肽链延长，直到终止信号进入A位。 1．识别：RF识别终止密码，进入核蛋白体的A位。? 2．水解：RF使转肽酶变为酯酶，多肽链与tRNA之间的酯键被水解，多肽链释放。 3. 脱离：模板mRNA、RF以及空载tRNA与核蛋白体脱离。? （三）肽链合成的终止 多肽链合成的终止过程 多肽链合成终止演示 U A G 5 3 RF COO- 第三节 蛋白质合成后加工和输送 从核蛋白体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性，必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 主要包括： 多肽链折叠为天然的三维结构肽链； 一级结构的修饰； 高级结构修饰。 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。可随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、模序、结构域到形成完整的空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成，而需要其他酶、蛋白辅助。 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 几种有促进蛋白折叠功能的大分子 分子伴侣 蛋白二硫键异构酶 (PDI) 肽-脯氨酰顺反异构酶 (PPI) 1. 分子伴侣： 分子伴侣是细胞一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。包括： ⑴ 热休克蛋白(HSP) ： HSP70、HSP40和GreE族 ⑵ 伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族 2. 蛋白二硫键异构酶： 多肽链内或肽链之间二硫键的正确形成对稳定分泌蛋白、膜蛋白等的天然构象十分重要，这一过程主要在细胞内质网进行。 二硫键异构酶在内质网腔活性很高，可在较大区段肽链中催化错配二硫键断裂并形成正确二硫键连接，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象。 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶： 多肽链中肽酰-脯氨酸间形成的肽键有顺反两种异构体，空间构象明显差别。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶可促进上述顺反两种异构体之间的转换。 肽酰-脯氨酰顺反异构酶是蛋白质三维构象形成的限速酶，在肽链合成需形成顺式构型时，可使多肽在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。 N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸残基，必须在多肽链折迭成一定的空间结构之前被切除。 二、一级结构的加工修饰 ① 去甲酰化： 甲酰化酶 甲酰蛋氨酸-肽 甲酸 + 蛋氨酸-肽 ② 去蛋氨酰基： 蛋氨酸氨基肽酶 蛋氨酰-肽 蛋氨酸 + 肽 （一）N端甲酰蛋氨酸或蛋氨酸的切除 由专一性的蛋白酶催化，将部分肽段切除。 （二）氨基酸的共价修饰 由专一性的酶催化进行修饰，包括糖基化、羟基化、磷酸化、甲酰化等。 （三）多肽链的水解修饰 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 N C 信号肽 PMOC KR KR 103肽 ( ？) ACTH ?-LT ?-MSH ?-MSH Endophin 三、空间结构的修饰 （一）亚基的聚合 具有四级结构的蛋白质由两条以上的多肽链通过非共价键聚合形成寡聚体。 （二）辅基的连接 结合蛋白合成后需要结合相应的辅基才能成为具有天然活性的蛋白质。 某些蛋白质需要在肽链的特定位点区价连接一个疏水性的脂链，并借此嵌入膜脂双层。 （三）疏水脂链的共价连接 蛋白质合成后，定向地被输送到其执行功能的场所称为靶向输送。 大多数情况下，被输送的蛋白质分子需穿过膜性结构，才能到达特定的地点。 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列。 四、蛋白质合成后的靶向输送 （一）分泌型蛋白的靶向输送 真核细胞分泌型蛋白前体合成后的靶向输送过程首先要进入内质网。 各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列，引导分泌蛋白进入内质网，称为信号肽 。 1. 信号肽： 常见的信号肽由10~40个氨基酸残基组成，可分为三段。N端为带正电荷的氨基酸残基，中间为疏水的核心区，而C端由小分子氨基酸残基组成。接着是信号肽酶的裂解位点。 在蛋白质被分泌后，信号肽序列可被信号肽酶识别并裂解。 常见分泌型蛋白质的信号肽序列 2. 分泌型蛋白进入内质网的过程： 分泌型蛋白的定向输送，就是靠信号肽与胞浆中的信号肽识别颗粒（SRP）识别并特异结合，然后再通过SRP与膜上的对接蛋白（DP）或SRP受体识别并结合后，将所携带的蛋白质送出细胞。 信号肽引导分泌型蛋白进入内质网 （二）线粒体蛋白的靶向输送 （三）细胞核蛋白的靶向输送 第四节 蛋白质生物合成的干扰和抑制 一、抗生素类 抗生素抑制蛋白质生物合成的原理 二、其他干扰