用于定量测定人血清或血浆中胰岛素(Ins)浓度。[用途].PDFVIP

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  • 2017-06-10 发布于湖北
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用于定量测定人血清或血浆中胰岛素(Ins)浓度。[用途].PDF

[药品名称] 125 通用名:碘[ I]- 胰岛素放射免疫分析药盒盒 125 汉语拼音:Dian[ I]YidaosuFangshemianyifenxiYaohe 125 英文名:Iodine[ I] InsulinRadioimmunoassayKit 125 简称:碘[ I] 胰岛素(Ins)放免药盒 [使用目的] 用于定量测定人血清或血浆中胰岛素(Ins)的浓度。 [用途] 胰岛素的测定主要用于对糖尿病的分型,即通过胰岛素释放实验,区分糖尿病的类型。 另外对于研究胰岛素β细胞的分泌功能、胰岛素瘤的分析、探讨冠心病机理等也有一定的意 义。 [试验原理] 本品采用了第二抗体+聚已二醇沉淀法放射免疫分析试验原理:含胰岛素(Ins)的样 125 品和 I标记的胰岛素(Ins)与相应的抗体反应形成抗原抗体复合物。反应后加入二抗及 PEG,使免疫复合物沉淀,离心,测沉淀放射性计数。通过标准曲线得到样本中胰岛素(Ins) 的浓度。 [试剂主要组成成分] 1、胰岛素标准品: 瓶,冻干品A-F,浓度分别为7、20、40、90、180、350mIU/L,使用 时加1.0ml温育液溶解。 2、质控血清:两瓶,冻干品,使用时加0.5ml蒸馏水溶解。 浓度为: L: H: 3、抗Insulin血清: 一瓶,蓝色溶液,2~8℃冷存。 125 4、 I-Insulin标记物:冻干品 1瓶,88.23kBq/100T,50管加5.5ml,100管加11ml,200 管加22ml温育液溶解。 5、分离剂: 一瓶,含二抗血清、PEG等,充分摇匀后使用,2~8℃冷存。 、温育液:一瓶,2~8℃冷存。 [仪器] 1、 γ-计数器 2、低温离心机 样本收集和保存: 220微升人血清样本。 采静脉血5ml于塑料试管中,静置使其凝固后,1500转/分离心,取其上清液,放置玻 璃瓶中。如果样本不立即使用,可在-18℃~-25℃储存 个月。 严重溶血、高浓度的脂类、胆红素对测定结果有影响。 [使用前准备] 试验前,恢复样本至室温,小心摇匀血清样本。 [实验方法] 1、 将实验所需试剂及样本放置室温,冻干品按操作要求进行溶解,平衡至少30分钟 以上才可进行操作; 2、 取60X12mm聚苯乙烯管进行编号,所有实验均做双管重复; 3、 每个NSB 管加入200µl温育液,每个标准品 “0”管 加入 100µl温育液; 4、 取每个浓度的标准品(A~F)、质控血清和样本100µl加入相应编号的试管中; 5、 每管均各加入 100µl标记物工作液; 、 每管均各加入 100µl抗体工作液,充分混匀; 7、 37℃温育2小时; 8、 每管均各加入500µl分离剂后,充分混匀; 9、 室温放置15分钟后,离心3500转/分,20分钟后,吸去或倾倒掉上清液; 10、 用 γ 计数器测定各管计数CPM. 推荐检测时间:1 分钟; 11、 从标准曲线上读取样本及质控血清的浓度。 操作流程(AssayProcedure) NSB 标准品(Standards) 样品(Samples) T O A B C D E F 1 2 ….. 温育液 (Incubate 200 100 solution) 标准品(STD) 100 100 100 100 100 100 A-F 样品(Samples) 100 100 …. 125I-Ins 100 抗INS血清 (Anti-Ins) 100 37

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