Wester Blot操作解析.pptVIP

生物化学与分子生物学实验 细胞与分子生物学实验教学平台 Western blot (immunoblotting) 步骤： 优点： 高分辨率的电泳技术 特异敏感的抗原-抗体反应 1-5 ng中等大小的靶蛋白 蛋白提取 Total protein – standard lysis buffer（lipa） Nuclear cytoplasmic extraction (NER-PER, extraction kit, Pierce) To prevent degradation always centrifuge samples at 4℃and include a protease inhibitor ? Protein Qantification : Standard BCA assay (Pierce) Bradford reagent SDS不连续电泳 Poly Acrylamide Gel Electrophoresis（PAGE）is the best method in protein separate。 Use PAGE to separate proteins by MW。 SDS： 阴离子去污剂 变性剂 氨