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喹诺酮说明书?
喹诺酮说明书?
篇一:Kernel 喹诺酮说明书(2014-1-7)
Kernel?喹诺酮酶联免疫反应试剂盒说明书
(货号:EVFQS-01)
1.概述
Kernel? 喹诺酮酶联免疫反应测试盒是用于检测鸡蛋、鱼/虾、鸡肉/猪肉、牛奶、血清/尿液、蜂蜜等样品中喹诺酮的残留量。该试剂盒特点包括:
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高回收率(80%),快速(10-40分钟),多种样品低成本提取方法。 高灵敏度(0.3ng/g或ppb)。
快速的ELISA检测方法(只需不到90分钟)。 高重现性。
2.试剂盒原理
Kernel? 喹诺酮酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,含有喹诺酮的药物抗原已经包被于微孔板上,在分析时,样品中药物特异性地与抗体相结合。如果药品中有药物存在,它将阻
止包被于微孔板上的药物与抗体结合。当与样品药物相结合的药物抗体被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,与经酶标记物相结合。反应后颜色深度与样品中喹诺酮的含量成反比。 3.试剂盒组成部分和储存
10ng/mL 30ng/mL 0.8mL
4.样品检测下限
5.交叉反应
6.未提供的设备或材料 1) 酶标仪(450nm) 2) 匀质器 3)
漩涡振荡器
4) 5) 6)
微量加样器(10、20、100和1000?L各一支) 多道枪:50-300?L 甲醇
7.注意事项
实验前请阅读以下文字,以保证获得最佳实验效果。 1) 2) 3) 4) 5) 6) 7) 8) 9)
标准品中含有喹诺酮,请小心使用。 不要使用过期的试剂盒。
不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保酶结合物及酶结合物稀释液正确配制。
尽量保持室温(22.5±2.5)°C,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。 孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。 从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。
8.样品的制备
样品保存在2-4℃不超过1-2天,如果需要保存较长的时间,应该放置-20℃。样品使用前应恢复到室温。 1×样品提取液:1(10×样品提取液):9(蒸馏水) 35%甲醇/样品提取液
混合6.5体积1×样品提取液和3.5体积100%甲醇。举例:取35ml 100%甲醇加入到65ml 1X样品提取液中,配制成100ml的35%甲醇/样品提取液,按需要,可同比例放大或缩小。 70%甲醇
按7:3的比例配制无水甲醇和双蒸馏水。举例:取70ml无水甲醇加入到30ml双蒸馏水中,配制成100ml的70%甲醇。按需要,可同比例放大或缩小。 鸡蛋
(1) 称取1g鸡蛋样品,加入4mL的70%甲醇。 (2) 最大速度涡旋振荡2分钟。
(3) 室温(22.5±2.5)°C下4000g离心5分钟。
(4) 移取0.5mL上清液到离心管中,加入0.5mL的1×样品提取液,混匀。 (5) 取50uL处理好的样品液用于分析。
稀释倍数:10.0
鱼/ 虾
(1) 去除样品中的脂肪,对样品进行匀质; (2) 取1.0g匀质样品,加入4mL70%甲醇; (3) 最大速度涡旋震荡10分钟;
(4) 室温(22.5±2.5)°C下4000g离心5分钟;
(5) 移取0.5mL上清液,加入0.5mL1×样品提取液,混合均匀。 (6) 取50μL用于检测。
稀释倍数:10.0
肌肉/肝脏/肾脏
(1) 去除样品中的脂肪,对样品进行匀质;
(2) 取1.0g匀质样品,加入4mL的35%甲醇/1×样品提取液,加入50uL的肌肉提取液I,最大速度涡旋震荡3分钟; (3) 室温(22.5±2.5)°C下4000g离心10分钟;
(4) 移取0.5mL上清液到离心管中,加入25uL的肌肉提取液II和 0.5mL的35%甲醇/1×样品提取液,涡旋振荡混匀30秒。 (5) 取出50uL上清液用于分析。
稀释倍数:10
牛奶
(1) 对于无脂牛奶,用35%甲醇/样品提取液进行5倍稀释即可(如200μL牛奶+800μL的35%甲醇/样品提取液),每孔取50μL稀释样品进行检测;
(2) 对于含脂牛奶,离心力4000g离心5分钟以去除上层脂肪层,再以35%甲醇/样品提取液进行5倍稀释即可(如200μL牛奶+800μL35%甲醇/样品提取液),每孔取50μL稀释样品进行检测。稀释倍数:5.0 血清/尿液
(1) 取0
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