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PCR (Polymerase Chain Reaction)检验技术 黑龙江中医药大学 临床医学院 诊断教研室 黄 萍 第一节 概述 一.? 何为PCR？ PCR聚合酶链反应 英文全称 polymerase chain reaction 简称为PCR 第一节 概述 二 PCR的基本原理 PCR聚合酶链反应实际上是一种快速的特定DNA 片断在体外扩增技术。 简单的说： DNA的特性三步曲: 高温变性 低温退火 中温延伸 通过一个热循环仪（DNA扩增仪）将特异片断的基因(DNA.又叫模板DNA）在短时间内，经过引物Taq酶和三磷酸脱氧核苷酸（dNTPs）等作用后，放大到几百万倍。最后得到能肉眼看到的DNA区带或可定量分析的DNA量。 第一节 概述 三 简单复习一下DNA的结构与复制 生命是由蛋白质合成的 蛋白质是由无数氨基酸连接成肽链而合成的 氨基酸则是由无数个基因即DNA组成的 这就是说DNA是蛋白质的生命 第一节 概述 DNA的基本构成单位： ①??? 脱氧核糖 ②核苷酸 ③磷酸 核苷酸有4种碱基： A——腺嘌呤 T——胸腺嘧啶 G——鸟嘌呤 C——胞嘧啶 第一节 概述 DNA的基本构成单位： C-胞嘧啶 ( G) A-腺嘌呤 (T) T-胸腺嘧啶 ( A) G-鸟嘌呤 (C) 脱氧核糖 磷酸 氢键 第一节 概述 DNA的基本构成单位： 在DNA结构中，4种碱基，以A—T、G—C 进行严格配对的。 A—T、G—C排列顺序的变化是 无穷无尽的。 人体中大约有30亿（3X109）DNA的基因组。 碱基的顺序是DNA的生命。 第一节 概述 RNA与DNA的区别： ①??? RNA的核糖是不脱氧的五碳糖 ②??? RNA的4种碱基是 A.U.G.C A——腺嘌呤 U——尿嘧啶 G——鸟嘌呤 C——胞嘧啶 U在DNA中对应的碱基是T（胸腺嘧啶） 第一节 概述 RNA与DNA的区别： 核糖 脱氧核糖 第一节 概述 碱基以3个为1组（三联密码） DNA ATG AAG AGT ↓ GTC CAT CAC TAA mRNA AUG AAG AGU ↓ GUC CAU CAC UAA 蛋白质 甲硫氨酸 赖氨酸 丝氨酸 缬氨酸 组氨酸 组氨酸 无意义 ATG（AUG）：起始密码，是转译的开始 TAA（UAA）：终止密码，是使1条肽链的合成到此中止。 CAT（CAC） 简并密码，是一种氨基酸，可以有多于 CAU（CAC） 1个的三联密码，但也是特定的。 第一节 概述 DNA与蛋白质合成的关系 用Watson和Crick的中心法则说明则是： 转录 翻译 DNA mRNA 蛋白质 逆转录 第一节 概述