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【2017年整理】肠胃舒胶囊等6种中成药微生物
肠胃舒胶囊等6种中成药微生物限度检查法验证实验总结
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一．目的
香港仁奇诊所：受你诊所的委托，我所抗生素室对肠胃舒胶囊等6种中成药微生物限度检测，并对其进行方法学验证，归纳总结如下：
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二．样品
骨络通酒011362北京北卫药业有限公司、化瘤胶囊302107北京北卫药业有限公司、肾宁丸21006北京北卫药业有限公司、消渴丸0201060北京北卫药业有限公司、肠胃舒胶囊030610北京北卫药业有限公司、防癌胶囊100210北京北卫药业有限公司．
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三．菌种
枯草杆菌63501、金黄色葡萄球菌26003、大肠杆菌44102、白色念珠菌98001、黑曲霉98003、沙门氏菌50094。
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四．方法
中国药典2000版与2005版微生物限度检查法方法验证的比较实验。
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五．方法验证：
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（一）．菌液制备
1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌肉汤培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用。
2．取经25 ℃培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用。
3．取经25 ℃培养1周的黑曲霉斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液，用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10- 4约50~100个/ ml，做活菌计数备用。
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（二）．供试液制备
称取各品种样品10 g，加0.1%胨水氯化钠稀释液100 ml浓度均为1：10供试液，分别人工污染上述5种试验菌株。
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（三）．培养基稀释法
采用加0.5 ml、0.2 ml、0.1 ml /皿供试液，再加15~20 ml琼脂培养基，待凝固后，置规定温度培养24~48小时观察结果，细菌计数，测定回收率。
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（四）．离心集菌薄膜过滤法
分别取不同品种的1：10供试液10 ml，移至灭菌的离心管中，以500转/分5分种后，取上清液1 ml，加入薄膜过滤器中，采用0.1%蛋白胨氯化钠冲洗液300ml/膜，再加规定菌株冲洗后，取膜贴于琼脂平板，置规定温度培养24~72小时观察结果
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