丹参酮ⅡA对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究论文.docVIP

　　丹参酮ⅡA对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及机制研究论文 杨萍，李杰，周凤华，李丽君，贾钰华 【摘要】 目的观察丹参酮ⅡA对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用差数贴壁法体外分离培养新生乳鼠心肌细胞，以200 μmol/L过氧化氢作用2 h 模拟心肌细胞氧化应激模型，分别以丹参酮ⅡA高、中、低剂量在造模前干预24 h。采用MTT法检测细胞活力，流式细胞仪Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡率.freelol/L过氧化氢作用2h后，细胞活力显著降低，凋亡率显著增高。与模型组比较，丹参酮ⅡA显著增加心肌细胞活力，降低细胞凋亡率。过氧化氢可导致心肌细胞LDH活性及MDA含量显著增加，并使总抗氧化能力（T-AOC）、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力显著降低，丹参酮ⅡA可呈浓度依赖性显著降低LDH活性及MDA含量，增加总抗氧化能力（T-AOC）、SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力。结论丹参酮ⅡA可以抑制过氧化氢诱导的心肌细胞损伤，这可能与其增强细胞抗氧化酶活力，降低脂质过氧化反应有关。 【关键词】 丹参酮ⅡA； 心肌细胞； 氧化应激 ChinaAbstract：ObjectiveTo study the protective effect and mechanism of Tanshinone ⅡA on myocardial damage induced by hydrogen peroxide.MethodsPrimary cultured neonate rat myocardial cell edium ol/L hydrogen peroxide, and the medium ented ined by MTT method. Annexin V/PI bivariate dyeing odel group, cell viability decreased significantly and apoptosis rate rose significantly pared al group. pared odel group, Tanshinone ⅡA increased cell viability and decreased apoptosis rate in a dose-dependent manner. pared al group, LDH and MDA increased remarkably, and T-AOC, SOD,.freelarkably in model group. pared odel group, Tanshinone ⅡA decreased LDH and MDA significantly ,and increased T-AOC, SOD, GSH-Px, CAT significantly in a dose-dependent manner. ConclusionTanshinone ⅡA can reduce myocardial damage induced by hydrogen peroxide, the mechanism may be related ent antioxidase activity, and decrease of lipid peroxidation. Key ia/reperfusion, I/R)损伤所带来的问题日益明显［1］。许多实验研究已证明，在心肌损伤区有大量自由基产生，自由基产生的氧化损伤是心肌损伤的重要因素，而应用自由基清除剂可以减轻组织细胞的损伤［2］。丹参是我国的传统中药，被广泛用于冠心病的治疗。丹参酮ⅡA（tanshinoneⅡ,TSN）是丹参最重要的生物活性部分［3］。本实验以体外培养的乳鼠心肌细胞为基础，以H2O2诱导细胞损伤为模型，旨在研究丹参酮ⅡA在氧化应激条件下对心肌细胞的保护作用，探讨其可能的作用机制，阐释丹参治疗心肌缺血性疾病的机理。 1 材料 1.1 动物出生1～3 d雄性EM培养基购于Gibico公司；丹参酮ⅡA购于中国药品生物制品检定所（批号110766-200417）；乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒、丙二醛(MDA)测定试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶(CAT)测定试剂盒、总抗氧化能力（T-AOC）测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所；AnnexinV-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。 2 方法 2.1 分组原代乳鼠心肌细胞经分离、纯化后进行实验分组，分为以下几组：①正常组：培养的正常心肌细胞培养；②模型组：心肌细胞培养液中添加200 μmol/L H2O2作用