Ghrelin及其基因在不同时期小鼠卵巢和子宫的定位研究.pdf

摘要  Ghrelin又名生长素， 是神经肽的一种。 经研究表明主要分布在动物的脑和胃、 肠内，又名脑肠肽。 为了探讨 Ghrelin在动物生殖调控中的作用，本试验通过免 疫组化技术确定  Ghrelin 在小鼠青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期卵巢和子宫 的定位，通过原位杂交技术明确 Ghrelin mRNA 在小鼠青春期、妊娠期、哺乳期 及泌乳后期卵巢和子宫上的分布。试验结果显示，(1) Ghrelin 在上述四个生理时 期小鼠卵巢中均有表达，Ghrelin 免疫阳性细胞主要分布于青春期、妊娠期、哺乳 期和泌乳后期小鼠卵巢的卵母细胞、间质细胞、髓质和黄体细胞上。但表达强度 和分布范围不同，妊娠期黄体与哺乳期的卵巢髓质  Ghrelin  阳性细胞呈强阳性表 达；妊娠期的小鼠卵巢的生殖上皮也出现阳性表达。 统计学分析结果表明青春期 的免疫阳性细胞均值显著低于妊娠期 8d和哺乳期 18d (P0.05)；妊娠期 8d  的免 疫阳性细胞均值显著低于哺乳期 18d 及泌乳后期  (P0.05)；哺乳期 7d 的免疫阳 性细胞均值显著低于哺乳期 18d (P0.05)；哺乳期 18d 的阳性细胞均值显著高于 泌乳后期  (P0.05)；青春期的灰度值显著高于妊娠期和哺乳期(P0.05)；妊娠期 的灰度值显著低于泌乳后期  (P0.05)；哺乳期的灰度值显著低于泌乳后期  (P0.05)。  (2)Ghrelin mRNA在上述四个生理时期小鼠卵巢中均有表达，Ghrelin  mRNA 阳性细胞主要分布于青春期、妊娠期、哺乳期和泌乳后期小鼠卵巢的卵母 细胞,间质细胞,黄体和髓质上。 但在妊娠期小鼠卵巢黄体和泌乳后期卵巢髓质上均 出现强阳性表达。经统计学分析可见妊娠期免疫阳性细胞数显著高于青春期和泌 乳后期(P0.05)；哺乳期免疫阳性细胞数与青春期显著高于泌乳后期  (P0.05)； 青春期灰度值显著高于妊娠期和哺乳期(P0.05)。(3)  Ghrelin在上述四个生理时期 小鼠子宫中均有表达，Ghrelin 阳性细胞主要分布于小鼠子宫浆膜下层结缔组织， 固有层，基底细胞和间皮细胞上。在妊娠期和哺乳期子宫单层柱状上皮也有表达。 经分析发现妊娠期的阳性细胞均值显著高于青春期、哺乳期及泌乳后期(P0.05)； 泌乳后期的阳性细胞均值显著低于与青春期、妊娠期及哺乳期  (P0.05)；妊娠期 的灰度值显著低于青春期、哺乳期及泌乳后期  (P0.05)。 (4)Ghrelin mRNA在上 述四个生理时期小鼠子宫中均有表达，Ghrelin mRNA  主要分布于小鼠子宫浆膜下 层结缔组织，固有层，基底细胞和间皮细胞上。Ghrelin mRNA在固有层出现强阳 性表达。通过分析发现妊娠期阳性细胞均值显著高于青春期，妊娠期和哺乳期  (P0.05)；青春期的灰度值显著高于妊娠期和哺乳期  (P0.05)；妊娠期灰度值显 著低于哺乳期和泌乳后期  (P0.05)。根据结果得出结论：Ghrelin 及其 mRNA 在 四个生理时期小鼠卵巢和子宫上均有表达，且在妊娠期出现强阳性表达，本结果 揭示 Ghrelin可能在小鼠不同生理时期，尤其是妊娠期有一定的调节作用。 关键词：Ghrelin, Ghrelin mRNA,  卵巢，子宫，定位   Abstract  Ghrelin is a kind of neuropeptides and is also known as auxin. Many studies  showed the presentation of Ghrelin is in brain, stomach and intestines, so Ghrelin is  also known as brain­gut peptides.  In order to proclaim the function of Ghrelin in  animal’s reproduction and regulation, the immunohisto­ chemical PV­9000 2­step  metho