扬州大学专业学位论文开题报告2016.doc

学号 MZ14560 　 　 　专业学位论文开题报告 论文题目： 猪戊型肝炎病毒间接elisa诊断试剂盒的研制 报 告 人： 焦梦龙 所在学院： 兽医学院 学位类别： 兽医硕士 专业领域： 预防兽医学 报告时间： 2016年4月28日 扬州大学研究生院制 论文选题的职业背景及应用价值： 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus, HEV)是近年来发现的一种新型肝炎病毒，自1980年以来，科学家们进行了大量的戊型肝炎病毒研究。1983年前苏联学者Balayan等首次用免疫电镜技术从一名志愿受试者粪便中观察到直径为27nm~30nm的病毒样颗粒，1989年东京国际会议正式命名此肠道传播的非甲非乙型肝炎病毒为戊型肝炎病毒戊型肝炎的传播途径主要是粪——口传播，常见方式是通过污染水源和食物，大的爆发流行主要发生在不发达、卫生条件差的国家。在我国，戊型肝炎流行发生在包括台湾在内的各省区、直辖市，明显的暴发流行发生在我国新疆和吉林，大的流行在辽宁、河北、内蒙、山东、湖北均有报道。在新疆、广州均有该病毒基因序列报道。全国戊型肝炎流行率在7%～15%之间。遍及25省，5个自治区和3个直辖市。感染率随年龄增长而增加，20岁左右是感染高峰，发病者主要为青壮年，孕妇死亡率高达10%～20%，是一种全国普遍流行危害比较严重的疾病我国的HEV基因型主要是Ⅰ和Ⅳ型，且Ⅳ型为人畜共患基因型。越来越多的研究证实动物成为HEV传播的主要媒介。HEV在我国猪群中广泛存在，对生猪生产是一个不可忽视的隐患，国内外均有带毒病猪传染人类的报道所以如何快速检测HEV，在猪群是防治戊型肝炎流行的一项重要措施。 论文研究的实际意义及论文形式（论文形式包括：基础研究、产品开发、规划设计、调研报告、案例分析、项目管理等）： 戊型肝炎病毒(HePatitisEvirus,HEv)曾经被认为是通过肠道传播的一种非甲一非乙型的肝炎病毒,前苏联科学家Balagan等在1983年第一次通过免疫电镜技术从一位白愿受试者粪便中分离到直径约为30nm的病毒样颗粒1989年的东京国际会议正式将这一类型的肝炎及其病毒分别命名为戊型肝炎(HE)和戊型肝炎病毒(HEv)Reye等在1990年应用分子克隆技术得到了该病毒的基因克隆并进行了序列分析,由此开始了对戊型肝炎病毒的研究近年来,戊型肝炎己被世界卫生组织认为是发展中国家的一个重要公共卫生问题,有关发展中国家HE呈地区性散发流行的报道越来越多,并且是散发性肝炎的主要类型,在一些地区可.片到急性病毒性肝炎的50%,人对HEV易感,病人发病症状重,病死率高,青壮年戊肝病死率可达2%,远较其它各型肝炎高,孕妇HE的死亡率可高达20%1986年在我国新疆戊型肝炎的爆发流行,造成了大约20万人的发病,孕妇的平均死亡率约为13% 随着对HEV动物宿主研究的开展,已在多种动物中检测到抗HEV抗体或病毒RNA,证实戊型肝炎为一种人畜共患病,可以感染猪!鼠!犬!鹿等动物,在猪和鼠的抗体阳性率高于50%,推测动物可能是HEV传播的重要宿主即使在戊型肝炎罕见的发达国家,戊型肝炎抗体也在动物及人群中广泛存在,显示这种病毒的多样性及广泛性可能远远超出了人们的想象,因此,近年来对该病毒的研究越来越受到重视由于从猪样品中克隆出的HEV与人源HEV高度同源,在免疫学检测上,猪源HEVO盯2表达蛋白与人源表达蛋白在特异性和敏感性上相当,猪源HEV可以跨种感染大猩猩和恒河猴,人源HEV可以感染猪同时血清流行病学调查发现从事与猪相关职业的人,其HEVIgG的阳性率要高于非相关职业人员鉴于我国猪戊型肝炎研究处于起步阶段,用于猪戊型肝炎的诊断方法还没有建立,因此急需一种快速!简便!敏感!廉价和能检测大批量样品的诊断方法用于猪群的抗体监测和流行病学调查 在临床HEV防制中需要先进的分子生物学或免疫学方法以确诊该病分子生物学方法中用于特异性检测病原的PCR!套式PCR!实时PCR和原位杂交等方法多针对组织病料检测,临床上还无法做到活体采样;血清学诊断方法中的间接免疫荧光实验方法仅适用于实验室操作,并且检测样品数量有限ELISA方法以其简便!快速!敏感!特异!可同时大批量检样的特点适合应用于现地,成为近年研究的方向国内外己有商品化戊型肝炎抗体或抗原ELISA诊断试剂盒,但昂贵的价格限制了其在动物HEV诊断上的)0泛应用,日前国内尚没有猪HEV诊断试