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180-188译文 6.5.3 离子交换和吸附树脂 使用吸附剂来从发酵液中回收物质是一种使用了很久的方法，它最初是使用活性碳。这种方法通过一步就可产生很大的浓缩效应，由于可以获得更多更特异的吸附剂，这种方法应用越来越多。例如，探索这种方法常常是研究任何一种新抗生素回收方法的第一步。 离子交换树脂 离子交换树脂是带有强烈吸附作用的离子基团聚合物，按照我们的选择，离子基团可以是阴离子或阳离子，按照环境条件，离子基团可以是离子化的形式或非离子化的形式。现在可获得的树脂类型列举于表6.5。固体离子交换剂通过分批式添加来使用，随后通过倾析或过柱的方法来移去树脂，包括这种离子交换柱的色层析将在下面6.6.2节介绍。 液体离子交换剂按照相似的原理工作，但是离子化的物质只溶解在非水溶剂载体中；然后通过液液吸附来分离产物，在任何一种情况下，目的产物通过离子置换从离子交换剂中回收，然后，离子交换剂再生。 在适当的条件下，，通过分批模式使用离子交换树脂来从代替澄清培养液的整个培养液中回收抗生素。 吸附树脂 实际上，树脂提供了一个与不能与它混合的液体溶剂相似特性的固体相，因此，它可代替萃 表 6.5 固体和液体离子交换剂 离子交换剂 基质 功能基团 固体离子交换树脂 苯乙烯—二乙烯—苯 羧基 丙烯酸 硫酸 甲基丙烯酸 单胺、二胺和 聚胺 三胺 纤维素 四胺 右旋糖苷 液体离子交换树脂 作用载体，溶剂用作 单胺、二胺和 功能基团 三胺 磷酸单脂 磷酸二脂 取程序。现在，可获得的这种树脂的范围十分广泛，它们的重要性我们在表6.6中加以总结。树脂为多孔的基质，它的功能基团可修饰基质的整个极性而不用离子化。大多数化合物常常是从水溶液中被吸收，而处于非分离状态；通过提取为有机溶剂或改变水相的PH或离子强度，从而回收树脂。吸附树脂的多孔性是很重要的，因为它决定着吸附表面及树脂总的吸附物质的能力。 表 6.6 吸附树脂的特性 物理性质 表面 20-80m2g-1 孔体积 0.5-1.2ml g-1 平均孔大小 5-130nm 化学性质 非极性 苯乙烯—二乙烯苯 半极性 丙烯酸脂 极性 亚砜.氨基化合物.N-O-基 6.6 混合物的纯化和分离 在一个适当设计的过程中，产物的回收及浓缩常伴随着一定程度的纯化。但是还需要进一步的步聚来纯化物，特别是当目的产物中还伴随着相似的共代谢物，在回收的早期阶段，共代谢物伴随着产物。这样在纯化中所面临的情形就可能或不需要较高的溶解度。两种最常用的方法是结晶和各种色层析方法；结晶易于放大，但色层析方法要求混合物有更大的溶解性。 6.6.1 结晶 结晶主要是用于诸如抗生素之类的低分子量化合物的纯化。例如，青霉素G常常是用丁基乙酸从发酵液中萃取出来，然后在乙醇溶液中加乙酸钾来结晶。一个相似的用于放线菌素分离和纯化的方法在图6.8进行了陈述。浓缩液的结晶是在乙酸中50℃下进行，同时添加石油醚直到溶液变混浊；溶液加热到65℃，然后冷却。 在更大规模上，结晶是诸如柠檬酸及谷氨酸钠之类产物纯化的最后步骤。 6.6.2 色层析 色层析方法可用于低分子量的化合物（混合物需要分离，例如同源抗体）和大分子物质（特别是酶，所伴随的产物具有相似的性质）。所必须的设备包括填充特异载体材料的层析柱，用于洗脱液的容器和泵动系统，它是一种有选择性地收集特殊洗脱组分的方法。 按照特定的分离过程，色层柱可能有很大差异，从相对高而窄的柱到短而宽的柱，例如药物分段层析柱，它由不锈钢制造而成。为优化溶解，常用大小均匀分布的装柱颗粒，把吸 发酵液，2500L 菌丝体分离；旋转过滤 过滤，2500；0.3g.L-1 菌丝体 3：1的丁基乳酸萃取 提取物；850L;0.84 g.L-1 萃取过滤液 3．浓缩