组织切片制备和染色技术.PDFVIP

组织切片制备及染色技术 （一）常规石蜡切片的制备： （1）取材与固定：切取组织时应使用锋利的刀、剪，切取组织块时，从刀的根部开始 向后拉动切开组织。组织块的厚度约为0.2~0.3cm，大小为 1.5cm x 1.5cm x 0.3cm 为宜。取 好的组织块用 10%福尔马林溶液固定 24~48h 。 （2 ）包埋：先经梯度乙醇脱水后用二甲苯透明，然后入溶融的石蜡中浸透每次30min， 共 3 次；再包埋。 （3 ）切片：包埋好的石蜡块即可进行切片；切片的厚度为5μm 左右。 （二）苏木精－伊红（hematoxylin and eosin,HE ）染色方法： （1）脱蜡：主要用二甲苯脱蜡。 （2 ）梯度乙醇水化。 （3 ）自来水冲洗。 （4 ）苏木精染色：水化后的切片放入苏木精染液中浸 5~20min，染细胞核。自来水冲 洗 3~5min 。 （5 ）1％盐酸乙醇分化5~30s 。自来水冲洗 1~3min。 （6 ）弱碱性水溶液返蓝30s~1min 。自来水充分冲洗5~10 分钟。 （7 ）伊红染色：充分水化后的切片直接入伊红染色液中，染细胞质5~15min 左右。 （8