棉花抗黄萎病性鉴定体系的优化和抗性机制的研究.pdfVIP

棉花抗黄萎病性鉴定体系的优化与抗性机制的研究 摘 要 本试验以不同抗性的棉花品种为材料，通过比较温室检测棉花黄萎病抗性的常用接 种方法的发病速度、鉴定周期和鉴定结果的准确性，比较各种接种技术的优缺点。通 过对供试品种的组织结构研究，了解棉花对黄萎病的抗性机制。并采用RGA 分子标记 技术找到与抗病性紧密连锁的引物，作为功能引物应用到棉花品种的抗性鉴定中，以 期优化检测棉花黄萎病抗性的鉴定体系。主要结论如下： 采用鉴别寄主法，对采自石河子市 134 兵团下野地试验站黄萎病圃的棉花黄萎菌 SHZ- 134 菌株进行生理型的鉴定。与已知生理型的菌株相比，菌株 V76 和 BA 属生理 1 型强致病力的落叶型菌株；菌株TS-2 和SHZ- 134 致病力相当，属生理3 型致病力中 等的非落叶型菌株；菌株3H 属于生理2 型，弱致病力的非落叶型菌株。 通过叶片针刺涂抹法、切根蘸菌法、定量法和菌液浇根法 4 种温室接种技术的比 较，发现叶片针刺涂抹法发病最快，发病较均匀，切根蘸菌法发病速度仅次于叶片针 刺涂抹法，菌液浇根法发病速度最慢，发病也比较轻。与病圃品种抗病性鉴定结果相 比，采用切根蘸菌法得到的鉴定结果与病圃鉴定结果一致性最高，达到 93.5% ，其次 是定量法，可达到 83.9% ，菌液浇根法与病圃鉴定结果一致性最差，采用切根蘸菌法 鉴定出的感病、抗病和耐病棉花品种个数与病圃鉴定结果差异不显著。因此从发病时 间、鉴定周期和鉴定结果等多方面进行综合评价，切根蘸菌法为比较可靠的温室鉴定 方法。 棉花根系的吸收根根长密度与相对病指呈显著正相关，相关系数为 0.923 ；抗病品 种与耐病品种、感病品种的吸收根根长密度差异显著，耐病品种与感病品种吸收根根 长密度差异不显著。抗病材料根、茎的组织中薄层细胞密度大于感病材料，耐病品种 根、茎的薄层细胞密度介于两者之间；抗病品种的根和茎的导管数最多，导管直径最 小，其次是耐病品种，感病品种的根和茎中导管数最少，但是导管直径最大。 采用 107 对 RGA 引物对新海20 和硕丰 1 号两个亲本进行多态性引物的筛选，共 筛选出 32 对多态性引物，将这些多态性引物在 436 个 F3 单株中进行进一步的筛选验 证，结果Gbrga3、Gbrga23、Gbrga54 这 3 对引物对抗病品种和感病品种的扩增结果与 田间的鉴定结果一致性达80% 以上。因此可以得出Gbrga3、Gbrga23、Gbrga54 这3 对 引物很可能与棉花抗黄萎病性紧密相关。 关键词：棉花；黄萎病；抗性鉴定；抗性机制 I The Optimization of Identification of Resistance to Verticillium Wilt in Cotton and Study on Resistant Mechanism Abstract In the experiment,in order to analyse the methods of identification of resistance to Verticilium wilt in cotton in greenhourse,31 cotton cultivals were used to compare the speed,period and veracity of the methods of inoculation.Tissue structure was studied to realize the resistance mechanism of cotton to Verticilium wilt.The RGA primers were used to find out the primer closely linked with resistance gene,which could be as function primers to serve for the identification.The main re