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* * ② 酶联免疫吸附试验 (ELISA) 将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上,并保持其免疫活性。测定时,将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显色,进行定性或定量测定。 * * 间接ELISA * * 夹心ELISA * * 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 模板DNA双链 形成新的双链DNA 退火 变性 ③ 聚合酶链反应(PCR) * * ④ 核酸杂交技术 核酸探针(probe)是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段,可检测待检样品中特定的基因顺序。 * * 二、病毒的血清学诊断 中和试验 补体结合试验 血凝抑制试验 免疫扩散等 * * virus 1、中和反应 观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡,能否抑制病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合,使其失去感染力的抗体又称中和抗体。 * * 2、免疫扩散 * * 三、病毒感染的防治 免疫预防 人工主动免疫 灭活疫苗: 乙脑疫苗 狂犬疫苗 流感灭活疫苗 HAV等 减毒活疫苗: 脊髓灰质炎疫苗 麻疹疫苗 腮腺炎疫苗 风疹疫苗 HAV疫苗 其他疫苗:基因工程疫苗,核酸疫苗 ,亚单位疫苗等 * * 药物防治 金刚烷胺-------抑制病毒脱壳-----预防感冒 核苷类药物 病毒蛋白酶的抑制物----indinavir 其他-----干扰素及干扰素诱生剂,中草药 抗病毒基因治疗----asODN,asON,核酶 ------疱疹净,阿昔洛韦,AZT 抗病毒药物 特异性抗体 治疗性疫苗 免疫制剂 * 抑制肿瘤细胞的DNA合成和有丝分裂(比对正常细胞的作用大500-1000倍); 去除组织相容性抗原的表达,使肿瘤细胞向正常细胞转化,有去恶性作用; 加强免疫细胞(NK、Mφ、Tc)的识别和杀伤(IFN-γ作用强 * * 分型 T淋巴细胞 成纤维细胞 白细胞 产生细胞 弱 强 抗病毒 强 弱 抗肿瘤 强 γ Ⅱ(免疫干扰素) β 弱 α Ⅰ 免疫调节 抗原类别 型别 * * INF抗病毒活性: 不直接灭活病毒,通过诱导细胞合成抗病毒蛋白(antiviral protein,AVP)发挥效应 作用迅速,感染后数小时即产生 AVP是酶类,故作用无特异性 * * IFN的诱生和作用示意图 * * AVP种类及作用: ①腺嘌呤核苷合成酶(2’-5’A合成酶):激活细胞内核酸酶,降解病毒mRNA ②蛋白激酶(PKR):使病毒蛋白转释超始因子磷酸化,阻止病毒蛋白质合成 * * 干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意图 激活核酸酶 * * 间接性、广谱性(非特异性)、种属特异性、 早期中断病毒复制,阻止感染扩散 抗病毒作用特点 抗病毒作用意义 抗病毒免疫 * * 抗肿瘤 抑制肿瘤细胞的DNA合成和有丝分裂 去除组织相容性抗原的表达,使肿瘤细胞向正常细胞转化 免疫调节 增强或抑制抗体形成及细胞免疫(依剂量和反应条件不同) 增强Mφ 、 NK 、CTL功能,促进IL分泌 干扰素的其它作用(INF-γ) * * NK作用特点: 非MHC限制性、非特异性 ADCC作用、清除病毒感染靶细胞 INF-γ可激活NK细胞活性 抗病毒免疫 NK细胞 * * 二、特异性免疫 按种类:IgG IgM IgA 体液免疫: 按功能: 中和抗体、 血凝抑制抗体、 补体结合抗体---内部抗原抗体 抗病毒免疫 外部抗原抗体 * * 外部抗原 内部抗原 * * 血凝素 * * 中和抗体: 针对病毒某些表面抗原的抗体,能与细胞外游离病毒结合,阻止病毒吸附易感细胞,消除病毒感染性 IgG、IgM、S IgA 作用机制: 直接封闭与细胞受体结合的病毒抗原表位 改变病毒表面构型,阻止病毒吸附、侵入易感细胞 * * 血凝抑制抗体: 针对病毒包膜上血凝素 刺突的抗体,可消除病毒感染性 补体结合抗体----非中和抗体 病毒内部抗原刺激机体产生的抗体,一般不能中和病毒、清除感染;但可作为血清学诊断的标准 * * 体液免疫在抗病毒感染中作用: 中和抗体---清除血清中游离病毒,阻止 感染发生,防止感染扩散 预防疾病、阻止扩散 非中和抗体---近期感染指标, 病毒感染诊断 * * 细胞免疫: 抗病毒感染中起重
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