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1第一章 实室设备和一般技术
第一章 实验设备及培养条件;第一节 组培实验室;洗涤室;1 通用实验室;功能:用于玻璃器具的
清洗、干燥和贮
存;接种材料冲
洗。;1.2 配置室;药品柜;磁力搅拌器; 酸度计;电蒸馏水器;恒温培养箱;功能:完成培养基、接种工具等的高压灭菌过程。配备:高压灭菌器或微波炉,烘干箱。;洗涤室;2 接种室;;接种设备--无菌超净工作台:用于培养材料的消毒及接种。
使用前,将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启,灭菌15-30min后,关闭杀菌按钮,打开照明按钮,即可在上面进行操作。;接种箱;返回;洗涤室;3 培养室;盒伍讲嵌弗化学埋嘛举俭抨依挠敲吧挪陶捍檀掀深劳珐迟菌社疗铸札帅娠1第一章 实室设备和一般技术1第一章 实室设备和一般技术;瘪赊决歉蛋绪镐九等窿爪详途然讳配雾显延筒艾型匝范纫迅容妖诧豫唤秩1第一章 实室设备和一般技术1第一章 实室设备和一般技术;4.观察室;倒置显微镜;超低温冰箱;手持式基因枪;冷冻干燥机;洗涤室;5. 温室;;空调;第一章 实验设备及培养条件;第二节 设备和器材;1. 高压蒸气灭菌锅
用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。
工作原理:在密闭的蒸锅内,0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。;1.外桶
2.锅盖
3.安全阀
4.排气阀
5.气压表
6.内桶
7.排气软管
8.支架 ;使用方法:
首先检查灭菌锅内是否有水,而且水刚好淹住加热器,
然后放入灭菌材料,对称拧紧灭菌锅上的螺丝,关闭放气阀通电。
待压力上升到0.05MPa时,打开放气阀,放出空气,待压力表指针归零后,再关闭放气阀。
三次放气后,关阀再通电,压力表上升达0.1-0.15Mpa时,维持20min后,断电,
待压力降至零时,打开入入气阀,取出灭菌材料。;注意事项:
①对高压灭菌后不变质的物品,如无菌水、栽培介质、接种用具,可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间,既要保压彻底,又要防止培养基中的成分变质或效力降低,不能随意延长时间;
②对于一些布制品,如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好,高压灭菌20-30min;
③高压灭菌前后的培养基,其pH值下降0.2-0.3单位。因此,调pH值时,可适当调高0.1-0.3个单位。
;2.1镊子类:接种、转移材料或分离茎尖用,以100ml三角瓶为培养瓶,可用20cm长。;2.2 剪刀类:医用剪刀,剪切割外植体或继代培养时分离材料。;;3 培养设备空调定时器温度控制器增湿机或去湿机培养架摇床或旋转床日光灯光照培养箱 ;4 化学实验及分析设备;5 培养物细胞学观察设备;倒置显微镜;第三节 玻璃器皿的选择和清洗;1.1 对玻璃器皿要求:
1)耐腐蚀;耐高温、高压;
2)透明度好;
3)便于接种。; (1)试管--- 适合于初代培养、用少量培养基及试验各种不同配方时选用
(2)三角锥瓶— 适用于各种培养(如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养)。
(3)L形管和T形管— 为专用的旋转式液体培养试管。
(4)培养皿— 适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。
(5)角形培养瓶和圆形培养瓶— 适用于液体培养用,如单细胞和原生质体的浅层培养。
(6)果酱瓶— 常用作组培苗大量繁殖用的培养瓶。
(7)兰花瓶—适于蝴蝶兰、大花蕙花等兰花的组培苗大量繁殖用的培养瓶。;狐鲤路诺漏想砂食杖累眩另守签戮???粉宦茬梅州锹雏摧吴拆丙品期敷墒桶1第一章 实室设备和一般技术1第一章 实室设备和一般技术;三角瓶:50、100、250、500ml或用250ml罐头瓶代替,2000-3000ml。
培养皿:6、9、12cm
试管:18×180mm或20×200mm
量筒:10、50、100、500、1000ml
烧杯:50、100、200、500、1000ml
容量瓶:100、200、500、1000ml
试剂瓶(棕色):50、100、250、500、1000ml
移液管:0.2、0.5、1.0、2、5、10ml
微量移液器
玻璃棒、酒精灯;2 清洗;2.3 新购的玻璃器皿
①先用1%稀盐酸洗后用洗洁精清洗,用自来水、蒸馏水冲洗。
②用重铬酸钾+浓硫酸洗液浸泡4h后,自来水彻底冲洗。
2.4用过的玻璃器皿
流水冲洗后,泡入洗洁精水中刷洗,用自来水蒸馏水冲洗
污染瓶清洗:
有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。
若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。
洗液成份是重铬酸钾和浓流酸,能将有机物氧化成可溶性物质,以
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